[发明专利]一种无血清成分的高效间充质干细胞培养液在审
| 申请号： | 201811332303.8 | 申请日： | 2018-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN109402050A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 李剑平;李晓丰 | 申请（专利权）人： | 沈阳中心血站 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 沈阳亚泰专利商标代理有限公司 21107 | 代理人： | 史力伏 |
| 地址： | 110000 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 培养液 间充质干细胞 趋化因子 端粒酶抑制剂 干细胞培养液 生物技术领域 充质干细胞 大规模培养 基础培养基 临床前研究 热休克蛋白 成分来源 谷氨酰胺 临床研究 青链霉素 人血小板 裂解液 无血清 干性 体外 种间 增殖 | ||
1. 一种无血清成分的高效间充质干细胞培养液，其特征在于，培养液包括以下成分：10%人血小板裂解液、0.4%青链霉素（Pen Strep）、2mmol/L长效谷氨酰胺、15ng/ml趋化因子XCL1、25ng/ml趋化因子CCL3、18ng/ml热休克蛋白(HSP70)、26ng/ml端粒酶抑制剂 IFN-α2b、基础培养基DMEM。
2.根据权利要求1所述的无血清成分的高效间充质干细胞培养液，其特征在于，培养液的pH值为6.8~7.0，渗透压为310 mOsm/kg。
3.一种无血清成分的高效间充质干细胞培养液的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、人血小板裂解液的制备：
（1）取2×1011 L-1的机采人血小板，加入250ml 离心瓶中，6000g 室温离心20min；
（2）去上清，加入生理盐水洗血小板，2000g室温离心10min后用15ml生理盐水悬起；
（3）置于-20℃冰箱中冷冻过夜，后置于室温下融化；
（4）如此进行三个循环，得血小板裂解液；
步骤2、 间充质干细胞培养液的制备：
分别取100ml人血小板裂解液、4ml Pen Strep（青链霉素）、2mmol 长效谷氨酰胺、15ng/ml趋化因子XCL1、25ng/ml趋化因子CCL3、18ng/ml热休克蛋白（HSP70），26ng/ml端粒酶抑制剂IFNα2b混合，然后用基础培养基DMEM补至1L体积，调节pH值为6.8~7.0，渗透压为310 mOsm/kg，即得本发明间充质干细胞培养液。
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