[发明专利]大蒜茎尖培育的良种繁育方法

说明书

大蒜茎尖培育的良种繁育方法，选取当年收获的10月至第二年6月的饱满无病伤大蒜鳞芽，去除外叶；在无菌环境用70％酒精浸没大蒜鳞芽，振荡30～60sec，然后用无菌水冲洗1～2次，再用10％次氯酸钠溶液振荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5～7次进行大蒜鳞芽脱毒；8～40倍解剖镜下，无菌培养皿内，用消毒后解剖针将大蒜鳞芽的叶片和叶原基剥掉，将剥离好的茎尖接种在接种培养基内培养18～22天，生成组培苗；将组培苗转移在茎尖分化培养基内，20天后生成分化苗，将分化苗继续扩繁3代或者转移至生根培养基内，30～40天分化成再生植株；再将再生植株微型蒜诱导或田间移栽，获得原原种；最后移栽原原种，繁育良种大蒜。

技术领域

本发明属于农产品种植领域技术领域，特别是涉及一种大蒜茎尖培育的良种繁育方法。

背景技术

大蒜(Allium sativum L.)为百合科(Liliaceae)葱属植物(Allium spp.)，大蒜是典型的无性繁殖作物,在生产上通常采用鳞茎繁殖，病毒一旦侵入大蒜植株，因鳞茎母体带病毒，以垂直传染方式传给后代，致使大蒜体内病毒浓度逐代增高，引起种性退化，产量及品质逐年降低。

茎尖培养是解决上述问题的重要途径。在蔬菜中，马铃薯试管薯的诱导技术已经非常成熟，百合等蔬菜在组织培养器皿中可以直接由组培苗诱导形成鳞茎、同样以鳞茎进行无性繁殖的大蒜，也可能基于组织培养及相关的诱导技术，建立微型姜诱导体系。这样以加快优质种姜繁殖，缩短生长周期，形成工厂化生产。同时，离体保存作为种质资源圃活体保存的替代技术，是保持无性繁殖种质资源多样性的重要保证，已成为资源研究领域的重要课题和研究热点。

虽然大蒜的组织培养和微型蒜的形成在过去已经有一些研究报道，也为大蒜的组织快繁殖奠定了一定研究基础。但传统茎尖脱毒的方法繁殖系数低和周期长是障碍脱毒蒜产业化的难题。为此，建立大蒜组织快繁、良种繁育技术非常必要。此技术可在大蒜组织培养快繁和工厂化种苗生产中应用。同时，还可为大蒜种质资源安全保存及资源高效分发利用提供技术保障。

发明内容

本发明的目的在于提供一种大蒜茎尖培育的良种繁育方法，通过对大蒜茎尖脱毒后接种培育，获得试管苗，经过试管苗继代扩繁分化和植株再生获得一定数量的再生植株，解决大蒜繁殖系数低而难以产业化的问题。

本发明所采用的技术方案是，大蒜茎尖培育的良种繁育方法，具体步骤如下：

步骤一、选取材料：选取当年收获的10月至第二年6月的饱满无病伤大蒜鳞芽，将大蒜鳞芽去除外叶，置于干净的器皿内，用沙布封口；

步骤二、接种环境灭菌消毒：对超净工作台、手和摄子杀菌消毒；

步骤三、大蒜鳞芽脱毒：在超净工作台无菌环境，先用70％酒精浸没大蒜鳞芽，振荡30～60sec，然后用无菌水冲洗1～2次，再用10％次氯酸钠溶液振荡灭菌10min，最后用无菌水洗涤5～7次；

步骤四、剥取大蒜茎尖进行接种：在无菌培养皿内，将大蒜鳞芽置于8～40倍解剖镜下，用消毒后解剖针将大蒜鳞芽的叶片和叶原基剥掉，将剥离好的茎尖接种在接种培养基内培养18～22天，生成组培苗；

步骤五、植株分化和再生：将无毒的组培苗转移在茎尖分化培养基内，20天分化为分化苗，再将分化苗继续扩繁3代或者转移至生根培养基内，30～40天分化成再生植株；

步骤六、获得原原种：对再生植株进行微型蒜诱导或者田间移栽，获得原原种；

步骤七、移栽原原种，繁育良种大蒜。

进一步的，所述步骤四的接种培养基为B5+6-BA0.1mg/l+NAA 0.1mg/l+3％蔗糖培养基。

进一步的，所述步骤五的茎尖分化培养基为B5+6-BA 1.0mg/l+NAA 0.1mg/l+PP3333.0ppm+3％蔗糖培养基。