[发明专利]一种量子点标记免疫球蛋白的方法在审
| 申请号： | 201811328067.2 | 申请日： | 2018-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN109307775A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 付清山;于林;李静辉;李奎;刘功成;付光宇;吴学炜;苗拥军 | 申请（专利权）人： | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/533 |
| 代理公司： | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 免疫球蛋白 连接臂 量子点 备用 震荡 量子点标记 偶联物 清洗 活化免疫球蛋白 双氨基聚乙二醇 反应物溶液 量子点溶液 反应活性 免疫检测 反应物 封闭剂 保存 超声 活化 偶联 位阻 | ||
1.一种量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述量子点和免疫球蛋白之间通过连接臂进行偶联，其具体步骤为：
第一步，将量子点活化、清洗，保存于pH7.4的0.05MPB溶液中备用；
第二步，将连接臂加入到第一步的量子点溶液中，并按照量子点:双氨基聚乙二醇=1:1之比例加入双氨基聚乙二醇在20~25℃条件下持续震荡3~5h,进行反应；
第三步，将第二步得到的反应物清洗后保存在pH7.4的0.05MPB溶液中备用；
第四步，活化免疫球蛋白后，将第三步得到的溶液加入其中并超声1~3min后，置于20~25℃条件下持续震荡3~5h,进行反应；
第五步，将第四步的反应液中加入封闭剂，20~25℃条件下持续震荡1~2h，离心，弃上清，得到量子点-连接臂-免疫球蛋白偶联物，保存在4℃备用。
2.根据权利要求1所述的量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述第四步活化免疫球蛋白时，需要将EDC、NHS、免疫球蛋白按2~4: 2~4:1~5之比例同时溶解在pH5.5的0.05M MES中，2~8℃条件下持续震荡1~2h。
3.根据权利要求2所述的量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述EDC、NHS、免疫球蛋白之间的比例为2: 4:1。
4.根据权利要求1所述的量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述连接臂为两端修饰有氨基的聚合物。
5.根据权利要求4所述的量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述聚合物为双氨基聚乙二醇，Mw为400，600，800，1000，2000，3400，5000，10000，20000。
6.根据权利要求4所述的量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述第五步中所用的封闭剂为浓度5mg/ml的 BSA溶液和浓度1mg/ml的精氨酸溶液，所用溶剂为pH5.5的0.05M MES。
7.根据权利要求1所述的量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述量子点为表面带有羧基的核壳量子点。
8.根据权利要求7所述的量子点标记免疫球蛋白的方法，其特征在于：所述核壳量子点为CdTe/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnSe 或CdSe/ZnS。
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