[发明专利]一种二萜类化合物的制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种具有新颖结构的二萜类化合物，该化合物从粘小奥德磨发酵液中分离而得。经检测，该化合物具有抗病毒的活性，尤其是抗丙型肝炎病毒（HCV）的活性，可作为先导化合物及药物候选物进一步研究开发。

技术领域

本发明涉及一种二萜类化合物的制备方法，特别涉及该二萜类化合物在制备抗丙型肝炎病毒药物中的应用。

背景技术

粘小奥德磨（Oudemansiella mucida Schrad ex Fr.），别名粘长根菇，白环菌，白粘密环菌。隶属担子菌纲（Basidiomycetes）伞菌目（Agaricales）白蘑科（Tricholomataceae）小奥德蘑属（Oudemansiella）。其形态特征为：子实体中等，白色。菌盖直径 4-10cm，半球形至渐平展，水浸状，粘滑或胶粘，边缘具稀疏而不明显条纹。菌肉白色，软，薄。菌褶白色，略带粉色，直生至弯生，宽，稀，不等长。菌柄长 4-6cm，粗 0.3-1cm，白色，圆柱形，基部膨大带灰褐色，纤维质，内实。菌环生柄的上部，白色，膜质。孢子印白色。孢子无色，光滑，近球形，16-22.9µm×15-20µm。褶缘和褶侧囊体无色，梭形至长筒形，顶端钝圆，65.7-113.8µm×17.7-20.2µm。生态习性：夏秋季生。南方可春冬季在树桩或倒木、腐木上群生或近丛生，有时单生，可引起木材腐朽。主要分布在河北、山西、黑龙江、福建、广西、陕西、云南、西藏等省。可食用，不过味道较差，并带有腥味。近期的研究表明，该菌种所含的化学成分具有抗菌、抗癌等活性。因而，进一步分离出其中的化学成分，并分析其药理活性具有重要的意义。

萜类化合物是指存在与自然界中、分子式为异戊二烯单位的倍数的烃类及其含氧衍生物。这些含氧衍生物可以是醇、醛、酮、羧酸、酯等。在天然药物化学成分的研究中，萜类成分的研究一直是较为活跃的领域，亦是寻找和发现天然药物生物活性成分的重要来源。二萜类化合物是由4个异戊二烯单位构成、含20个碳原子的化合物类群。它们的结构显示多样性，但都是由焦磷酸香叶基香叶酯（geranylgeranyl pyrophosphate, GGPP）衍生而成，几乎都成环状结构。二萜类化合物广泛分布于植物界和微生物界中，许多二萜的含氧衍生物具有多方面的生物活性，有的已是重要的药物。

丙肝病毒全球感染近1亿7千万人，具有很高的发病率（2%–3%）和死亡率。HCV是一种由包膜的正链RNA病毒，共有9.6kb基因组。HCV生命周期包括进入宿主细胞、翻译、多聚蛋白加工、RNA复制、组装和释放等过程。HCV基因组的翻译提供了3000多个氨基酸的长多聚蛋白，有宿主和病毒蛋白酶进行加工。HCV一般是用核苷类似物利巴韦林（ribavirin）联合人α-干扰素（α-IFN）进行广谱的抗病毒治疗。但患者耐受性差，不能对各型HCV病毒均等起效，由于疗效不佳，副作用大的原因，有必要研发具有抗丙肝病毒活性的新化合物。

发明内容

本发明的目的在于从粘小奥德磨的发酵液中分离出一种二萜类化合物，该二萜类化合物对HCV病毒具有较强的抑制作用。

本发明涉及的二萜类化合物的结构式为：

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

所述化合物从粘小奥德磨菌的发酵液中分离而得。

优选的，所述分离步骤包括：（1）粘小奥德蘑的液体发酵培养；（2）发酵液的提取分离。

优选的，所述粘小奥德蘑的液体发酵培养的方法具体为：将粘小奥德蘑菌种于培养基中进行活化培养，随后取活化好的粘小奥德蘑菌菌丝体进行发酵培养。

优选的，所述发酵液的提取分离的具体方法为：将发酵液进行浓缩，有机溶剂萃取，有机相浓缩后得到的粗提物进行柱层析分离，并经制备型HPLC纯化得到目标产物。