[发明专利]利用基因编辑系统筛选低免疫细胞系的SuperH细胞母系、其构建方法及其应用有效
| 申请号: | 201811320655.1 | 申请日: | 2018-11-07 |
| 公开(公告)号: | CN109385405B | 公开(公告)日: | 2021-09-07 |
| 发明(设计)人: | 鲁文静;兰峰;张治宇 | 申请(专利权)人: | 北京赛贝生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/90 |
| 代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 韩建伟;金田蕴 |
| 地址: | 100220 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 利用 基因 编辑 系统 筛选 免疫 细胞系 superh 细胞 母系 构建 方法 及其 应用 | ||
1.一种利用基因编辑系统筛选低免疫细胞系的SuperH细胞母系,其特征在于,所述SuperH细胞母系是由H9细胞系转入HESPer基因元件形成,所述HESPer基因元件包括有效连接的第一启动子、HLA-E基因、Sr39tk基因、第一终止子、loxP序列、第二启动子、筛选基因和第二终止子;所述HESPer基因元件还包括有效连接的增强子,所述第一启动子不同于所述第二启动子,所述第一终止子不同于所述第二终止子;所述HESPer基因元件的序列如SEQID NO:1所示。
2.一种如权利要求1所述的利用基因编辑系统筛选低免疫细胞系的SuperH细胞母系的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,构建HESPer基因元件,所述HESPer基因元件的序列如SEQ ID NO:1所示;
S2,将所述HESPer基因元件连接至质粒;
S3,利用基因编辑系统将所述HESPer基因元件敲入所述H9细胞系的AAVS1位点上,并利用所述筛选基因筛选获得所述SuperH细胞母系。
3.一种如权利要求1所述的SuperH细胞母系在筛选低免疫细胞系中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:将目标基因的gRNA转入所述SuperH细胞母系,经所述gRNA所携带的抗药基因对应的药物筛选获得稳定细胞系后,进行ELISA检测细胞系的免疫反应。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述gRNA为一个或多个。
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