[发明专利]脱毛酶制剂的制备方法及其在黄牛皮脱毛中的应用

权利要求书

1.脱毛酶制剂在黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于脱毛酶制剂的制备方法包括如下工艺步骤：

A、发酵：将枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC No.14836按照质量比为2％-4％的接种量接种于含10μg/ml Cm，装液量为2.5L-3.5L的2YT发酵培养基中，在温度为35-37℃、转速为180-200转/分钟的条件下发酵，当OD₆₀₀值为0.5-1时加入0.5‰-1‰的诱导剂IPTG，转速调至250-300转/分钟的条件下培养40-44小时后终止发酵制成含有脱毛酶的发酵液；

B、脱毛酶液体制剂的制备：将步骤A中制成的含有脱毛酶的发酵液离心收集上清液，加入防腐剂制成脱毛酶液体制剂。

2.根据权利要求1所述的脱毛酶制剂在黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于还包括一步骤C，该步骤的工艺条件如下：

C、脱毛酶固体制剂的制备：将步骤A中制成的含有脱毛酶的发酵液离心收集上清液，将离心收集的上清液添加0.5％-2％的元明粉后在出风温度50-60℃条件下真空喷雾干燥，制成脱毛酶固体制剂。

3.根据权利要求1或2所述的脱毛酶制剂在黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC No.14836接入发酵培养基之前进行扩大培养。

4.根据权利要求3所述的脱毛酶制剂在黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于所述的扩大培养包括菌种活化、摇瓶菌种的制备。

5.根据权利要求4所述的脱毛酶制剂在黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于所述的菌种活化是将枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC No.14836按2％-4％接种量接种于含10μg/ml Cm的5ml LB液体培养基中，在温度为35-37℃、转速为160-180转/分钟的条件下培养6-10小时。

6.根据权利要求4所述的脱毛酶制剂在黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于所述的摇瓶菌种是将活化后的菌种接种于含10μg/ml Cm的50-100ml 2YT培养基中，在温度为35-37℃、转速为160-180转/分钟的条件下培养8-12小时。

7.根据权利要求1所述的脱毛酶制剂在黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于包括如下工艺步骤：

a、干皮浸水

将干皮洗净，除去毛皮中杂物，加0.2％-0.4％的浸水酶，pH＝8-10，室温浸泡至皮块成鲜皮状；

b、去肉

将步骤a所制备的浸水后的牛皮去除肉面脂肪；

c、除脂

将步骤b中去除肉面脂肪的皮块，加0.4％-0.6％的碱性脂肪酶和1％-2％的Tween-80，在pH＝7-9的条件下除脂；

d、有温有浴转鼓酶脱毛

将步骤c所制备的除脂后的皮块在固液比＝1:3-5、温度为33℃-35℃、脱毛酶制剂用量80U/ml-120U/ml、转速7-9转/分钟的条件下转鼓脱毛3-6小时。