[发明专利]一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用有效
申请号: | 201811308621.0 | 申请日: | 2018-11-05 |
公开(公告)号: | CN111139211B | 公开(公告)日: | 2022-11-18 |
发明(设计)人: | 鲍杰;侯伟亮;姚瑞苗;张宏森;金慈;张建 | 申请(专利权)人: | 山西合成生物研究院有限公司 |
主分类号: | C12N1/36 | 分类号: | C12N1/36;C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 王卫彬 |
地址: | 030001 山西省太原市山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高效 利用 葡萄糖 碳源 氧化 葡糖 杆菌 适应性 进化 方法 及其 应用 | ||
1.一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)对木质纤维素原料进行预处理和糖化制备包含抑制物水解液;
(2)对预处理原料进行脱毒移除抑制物并糖化制备无抑制物包含水解液;
(3)在包含抑制物木质纤维素水解液中培养氧化葡糖杆菌,而后转入无抑制物水解液中继续培养,依此交替转接直至菌株发酵性能达到稳定;
(4)在合成培养基和木质纤维素水解液中进行高效发酵验证。
2.根据权利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用,其特征在于,在所述的步骤(1)中,预处理方法为干法稀酸预处理,预处理条件为:木质纤维素固体与稀硫酸液体的质量比为1:1-2:1,硫酸用量为木质纤维素原料干重的1%-10%,处理温度为150-220℃,处理时间为1-20min。
3.根据权利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用,其特征在于,在所述的步骤(1)中,预处理物料中有毒的抑制物组分包括糠醛,羟甲基糠醛,乙酸等。
4.根据权利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用,其特征在于,在所述的步骤(2)中,脱毒方法为固态生物法移除抑制物,脱毒条件为:预处理物料pH调至4.0-7.0,含水量为50%-60%,接入树脂枝孢霉Amorphothecaresinae ZN1在脱毒反应器内于25-35℃,0.01-1.5vvm的通气量条件下脱毒12-120h。
5.根据权利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用,其特征在于,在所述的步骤(1)和(2),糖化操作中木质纤维素原料的固体含量为5-30%(质量百分比),糖化水解液中包含糖类有葡萄糖和非葡萄糖碳源(木糖,阿拉伯糖,甘露糖和半乳糖)。
6.根据权利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用,其特征在于,在所述的步骤(3)中,菌株培养条件为:转速为100-250rpm,温度为25-30℃,培养时间为12-36h。
7.根据权利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖杆菌适应性进化方法及其应用,其特征在于,在所述的步骤(3)中,适应性进化获得新菌株已于2017年10月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏编号为CGMCCNo.14801。
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