[发明专利]17-AAG葡萄糖苷及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明以17‑AAG为底物，利用糖基转移酶(YjiC)，将UDP‑glucose作为供体，通过体外酶法糖基化法制备出新型的Corylifol A糖基化衍生物17‑AAG葡萄糖苷，其结构如式(I)所示，并研究其理化性质，证明17‑AAG葡萄糖苷的水溶性是底物的10.5倍，并且对pH具有较好的稳定性；而且17‑AAG葡萄糖苷抑制Hsp90ATPase活性的IC₅₀值为131.8μmol/L；在体外对人肝癌细胞、人乳腺癌细胞、人结肠癌细胞都具有很强的抑制增殖作用，而且裸鼠体内试验也证明17‑AAG葡萄糖苷具有显著抑制肿瘤生长的活性，并且毒性低，具有很好的临床抗肿瘤药的应用前景。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体是涉及一种17-AAG葡萄糖苷及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

近年来，多种恶性肿瘤发病率在世界范围内呈上升趁势，严重危害着人类健康和生命，而化疗是治疗恶性肿瘤的重要手段之一。因此，向临床提供安全、高效的抗肿瘤创新药物是当前医药工作者的重要使命。

热休克蛋白90(Hsp90)作为分子伴侣蛋白调节众多信号蛋白的构象成熟和稳定性，在细胞生长、分化、凋亡、癌变和肿瘤的发展等方面发挥着重要作用，已成为了抗肿瘤药物研发的重要靶点之一。目前，已超过200种蛋白被确定为Hsp90的客户蛋白，其中包括跨膜酪氨酸激酶受体(Her-2)、血管内皮生长因子受体、Akt、Raf-1、突变信号蛋白(v-Src、p53)、HIF-1α、MMPs等，在肿瘤发生、转移的信号通路中起重要作用。

格尔德霉素(geldanamycin)是第一个被发现的Hsp90抑制剂，最初是从吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)发酵液中分离得到的天然产物，属于苯醌安莎类抗生素。格尔德霉素作为抗肿瘤候选药物具有很强的抗肿瘤活性，但由于其肝毒性、水溶性差等缺点，限制了临床上的应用。近年来，许多学者为提高格尔德霉素的水溶性、降低其毒性和增强其生物利用度进行了比较广泛的结构改造，并取得了一定成果。如，17-AAG(Tanespimycin，格尔德霉素的类似物)的抗肿瘤活性高于格尔德霉素，而且肝毒性也大大降低，目前已经进入了III期临床试验阶段。但是17-AAG依旧存在一定的肝毒性、水溶性较差、生物利用度有限等不足。

小分子化合物的糖基化修饰，不仅可以增加化合物结构多样性，而且在功能上这些糖分子也参与了目的细胞的识别，提高化合物得水溶性，影响起生物活性。如7β-xylosyl-10-deacetyl taxol(CAS：90332-63-1)及其衍生物在保留抗肿瘤活性的同时，显著地提高了其水溶性以及对肿瘤细胞的特异选择性。目前常用的糖基化途径有化学合成法、生物合成途径工程技术、生物转化技术和体外酶法糖基化反应(in vitro enzymaticglycosylation)等。虽然体外酶法糖基化反应具有令人满意的产率与选择性，但寻找一种具有底物特异选择性的糖基转移酶是关键，糖基转移酶是糖基化的天然产物生合成途径上重要的一种酶，其主要功能是催化供体上的糖转移到非糖体(aglycon)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种17-AAG葡萄糖苷及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用，利用糖基转移酶(YjiC)，将UDP-glucose作为糖供体，对底物17-AAG进行结构修饰，通过体外酶法糖基化反应制备出17-AAG葡萄糖苷，获得了令人满意的产率与选择性，并研究其理化性质，证明本发明的17-AAG葡萄糖苷不仅具有较好的水溶性和稳定性，还具有显著的抗肿瘤作用，17-AAG葡萄糖苷及其盐在制备抗肿瘤药物中具有广阔的应用前景。

为实现上述目的，本发明提供了一种17-AAG葡萄糖苷，具有如式(I)所示的结构式：

本发明的17-AAG葡萄糖苷的制备方法，具体为：