[发明专利]一种检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法有效
| 申请号： | 201811300737.X | 申请日： | 2018-11-02 |
| 公开（公告）号： | CN109283149B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 柳志强;岑宇科;林建光;王俊优;郑裕国 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 韩聪 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 赤霉素 发酵 液中藤仓赤 霉菌 活性 菌体 方法 | ||
1.一种检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取待测发酵液与预配的XTT-甲萘醌显色试剂混合形成反应体系，经温育制得待测液；
(2)利用分光光度计测量待测液在450nm处的光密度OD450；
(3)测得的OD450数值直接用于表征待测发酵液中的藤仓赤霉菌活性菌体量；
或者根据公式W＝5.57×10-6e1.3816M+4.5×10-6，其中W为细胞干重，单位为g，M为OD450读数，干重样本与OD450样本存在200倍的差异，计算待测发酵液中的细胞干重，表征藤仓赤霉菌活性菌体量。
2.如权利要求1所述的检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法，其特征在于，步骤(1)中，反应体系中XTT的终浓度为100-500μg/mL，甲萘醌终浓度为1-25μM。
3.如权利要求2所述的检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法，其特征在于，步骤(1)中，反应体系中XTT的终浓度为200μg/mL，甲萘醌终浓度为5μM。
4.如权利要求1所述的检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法，其特征在于，步骤(1)中，待测发酵液与预配的XTT-甲萘醌显色试剂等体积混合。
5.如权利要求1所述的检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法，其特征在于，所述温育的条件为25-30℃下温育15-180分钟。
6.如权利要求5所述的检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法，其特征在于，所述温育的条件为28℃下温育60分钟。
7.如权利要求1所述的检测赤霉素发酵液中藤仓赤霉菌活性菌体量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述待测液先进行离心后取上清液再测定光密度值，所述离心的条件为转速3000-4000rpm，离心时间为1-3分钟。
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