[发明专利]益心舒中药制剂中黄芪甲苷的含量检测方法

权利要求书

1.一种益心舒中药制剂中黄芪甲苷的含量测定方法，该中药制剂由下列重量份数的原料药组成：300份人参、300份麦冬、200份五味子、300份黄芪、400份丹参、200份川芎、300份山楂组成；其特征在于：测定方法由以下步骤组成：

a、供试品溶液的制备：取制剂，加入甲醇，浸泡过夜，超声处理，放冷，称重，用甲醇补足重量，滤过，量取续滤液，蒸干，残渣用水转移至分液漏斗中，再用三氯甲烷振摇提取3次，弃去三氯甲烷，水层用水饱和的正丁醇振摇提取5次，合并正丁醇液，用0.5％NaOH溶液洗涤2次，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，合并NaOH洗液和水洗液，再用水饱和的正丁醇振摇提取2次，与上述正丁醇液合并，蒸干，残渣加75％甲醇溶解，转移至10ml量瓶中至刻度，摇匀，即得；

b、对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

c、测定：分别精密吸取对照品溶液10μL、20μL以及供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪中测定，以外标两点法对数方程式计算，测得黄芪甲苷含量。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于测定方法由以下步骤组成：

a、供试品溶液的制备：取相当于该中药制剂生药量20-50g的制剂，加入甲醇50ml，浸泡过夜，超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足重量，滤过，量取续滤液25ml，蒸干，残渣用水20ml转移至分液漏斗中，再用三氯甲烷振摇提取3次，每次20ml，弃去三氯甲烷，水层用水饱和的正丁醇振摇提取5次，正丁醇每次用量分别是20ml、20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用0.5％NaOH溶液洗涤2次，每次10ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml，合并NaOH洗液和水洗液，再用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10ml，与上述正丁醇液合并，蒸干，残渣加75％甲醇溶解，转移至10ml量瓶中至刻度，摇匀，即得；

b、对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

c、测定：分别精密吸取对照品溶液10μL、20μL以及供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪中测定，以外标两点法对数方程式计算，测得黄芪甲苷含量。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：所述步骤c中高效液相色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；检测器为蒸发光散射检测器，蒸发光散射检测器漂移管温度为75-85℃，气体流速为2.3-2.7L/min；流动相为体积比为75:25的甲醇-水，流速为0.7-0.9ml/min。

4.根据权利要求1-3任一项所述的测定方法，其特征在于该中药组合物的制剂剂型为胶囊剂、片剂或丸剂。

5.根据权利要求4所述的测定方法，其特征在于黄芪甲苷的含量测定由以下步骤组成：

a、供试品溶液的制备：取相当于生药量13.5g的该中药组合物胶囊4g，倒出内容物，研细，加入甲醇50ml，浸泡过夜，超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足重量，滤过，量取续滤液25ml，蒸干，残渣用水20ml转移至分液漏斗中，再用三氯甲烷振摇提取3次，每次20ml，弃去三氯甲烷，水层用水饱和的正丁醇振摇提取5次，正丁醇每次用量分别是20ml、20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用0.5％NaOH溶液洗涤2次，每次10ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10ml，合并NaOH洗液和水洗液，再用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10ml，与上述正丁醇液合并，蒸干，残渣加75％甲醇溶解，转移至10ml量瓶中至刻度，摇匀，即得；

b、对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

c、测定：分别精密吸取对照品溶液10μL、20μL以及供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪中，测定，高效液相色谱中填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；检测器为蒸发光散射检测器，蒸发光散射检测器漂移管温度为80℃，气体流速为2.5L/min；流动相为体积比为75:25的甲醇-水，流速为0.8ml/min，以外标两点法对数方程式计算，测得黄芪甲苷含量。