[发明专利]一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法在审

专利信息
申请号: 201811285500.9 申请日: 2018-10-31
公开(公告)号: CN109321560A 公开(公告)日: 2019-02-12
发明(设计)人: 朱辉;曹艳茹;莫洪;张翠英;邓涛;庞雪;韩晓彤;石蕊 申请(专利权)人: 成都雅途生物技术有限公司
主分类号: C12N13/00 分类号: C12N13/00;C12N15/01;C12R1/465
代理公司: 成都弘毅天承知识产权代理有限公司 51230 代理人: 蒋秀清
地址: 610041 四川省成都市高新*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 雷帕霉素 复合诱变 链霉菌 筛选 链霉素抗性 高产 菌种 等离子体 生物工程领域 遗传稳定性 常温常压 菌种诱变 抗性筛选 起始菌株 摇瓶培养 紫外诱变 诱变 突变
【权利要求书】:

1.一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法,其特征在于,包括如下步骤:

[1]起始菌株的筛选:选择高产雷帕霉素水平高的菌株作为诱变出发菌株;

[2]菌种诱变:依次通过常温常压等离子体诱变、紫外诱变和复合诱变对步骤[1]得到的诱变出发菌株进行诱变;所述复合诱变为先进行紫外诱变,然后进行常温常压等离子体诱变;

[3]结合链霉素抗性对经过步骤[2]诱变的菌株进行抗性筛选,通过摇瓶验证复筛,筛选出高产菌株,制备冷冻管,进行菌种保藏。

2.按照权利要求1所述的一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法,其特征在于,在经过步骤[3]的处理后,还进行步骤[4]:进行传代验证,将筛选出的高产菌株进行连续斜面传代,连续传代5次,摇瓶验证发酵产雷帕霉素的能力。

3.按照权利要求1所述的一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法,其特征在于:所述常温常压等离子体诱变的条件为高纯氦气,功率120W,工作气流量10L/min,诱变距离2mm,诱变时间为10s~90s。

4.按照权利要求1所述的一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法,其特征在于:所述的紫外诱变的条件为用20W紫外灯在20cm处照射20~100s。

5.按照权利要求1所述的一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法,其特征在于:步骤[3]所述的抗性筛选为将经过诱变的菌株涂布于链霉素抗性平板上进行选育。

6.按照权利要求1或5所述的一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法,其特征在于:所述抗性筛选的链霉素浓度为0.2~0.8g/L。

7.按照权利要求1至5任一项所述的一种高产雷帕霉素链霉菌的选育方法,其特征在于:所述菌株的发酵培养周期为192~240h。

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