[发明专利]一种酶法拆分制备(R)-1-(2-萘基)乙胺的方法

说明书

本发明涉及化学酶法制备(R)‑1‑(2‑萘基)乙胺的方法，以水滑石或类水滑石负载纳米钯，得到固定化钯；环氧树脂载体表面共价结合南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)，得到固定化CALB，以固定化CALB为催化剂，以甲苯为溶剂，4‑硝基苯基乙酸乙酯为酰基供体，(R)‑1‑(2‑萘基)乙胺选择性被酯化；在固定化纳米钯催化下，(S)‑1‑(2‑萘基)乙胺与氢气发生消旋反应，反应结束后气固液分离。该方法将钯催化剂固定化，提高了其重复使用率，同时将南极假丝酵母脂肪酶B共价固定，提高了其操作稳定性。

技术领域

本发明涉及一种生物拆分法，具体涉及一种酶法拆分制备(R)-1-(2-萘基)乙胺的方法。

背景技术

(R)-1-(2-萘基)乙胺是合成冠状病毒PLpro蛋白酶抑制剂的重要医药中间体；也是合成用于催化芳香醛的不对称烷基化反应手性配体的重要原料；同时可作为手性碱拆分多种酸。目前拆分制备(R)-1-(2-萘基)乙胺的方法主要包括化学法和酶法：

化学拆分法：如科研论文报道的手性酒石酸、L-天冬氨酸、手性萘普生以及日本专利报道的6-甲氧基-萘基乙醇酸(JP 2005060231)等手性拆分剂与1-(2-萘基)乙胺消旋体成盐，利用不同手性1-(2-萘基)乙胺盐在溶剂中的溶解度不同，通过结晶将(S)-1-(2-萘基)乙胺和(R)-1-(2-萘基)乙胺分离。该过程流程比较长，且理论收率最大只有50％。

酶法拆分法：由于化学拆分剂的缺点，人们选择了酶作为拆分剂。酶法拆分的优点在于：条件温和，底物识别性好，产品纯度高。但是酶法拆分最高拆分理论收率是50％。为了提高收率，在酶法拆分的基础上结合消旋工艺，实现了1-(2-萘基)乙胺动态动力学拆分(CN104152527 B,CN 104152528 B)。

目前酶法拆分过程为，(R)-1-(2-萘基)乙胺在南极假丝酵母脂肪酶(Novozym435)作用下酯化，同时(S)-1-(2-萘基)乙胺在镍催化剂作用下加氢消旋，拆分和消旋在一个步骤中进行。(R)-1-(2-萘基)乙胺酯化物水解萃取后得到(R)-1-(2-萘基)乙胺。

该工艺路线较短，但是镍催化剂消旋速度慢；同时南极假丝酵母脂肪酶物理吸附在载体上，重复利用性差。因此，提高消旋催化剂反应速率以及提高酶催化剂重复利用率是该工艺路线需要解决的最大问题。

发明内容

本发明目的是提供一种动态动力学法化学酶法拆分1-(2-萘基)乙胺，获得(R)-1-(2-萘基)乙胺酯化物，接着在碱性条件下水解得到(R)-1-(2-萘基)乙胺。主要解决目前镍催化剂消旋速度慢，酶催化剂重复利用率差等问题，提高消旋催化剂反应速率以及南极假丝酵母脂肪酶B的重复使用率。

实现本发明采用的技术方案为：以消旋1-(2-萘基)乙胺为底物，以固定化南极假丝酵母脂肪酶B为催化剂，甲苯为溶剂，以4-硝基苯基乙酸乙酯为酰基供体，在一定温度下，(R)-1-(2-萘基)乙胺被选择性酯化成(R)-1-(2-萘基)乙胺酯化物；(S)-1-(2-萘基)乙胺在固定化钯催化剂作用下，(S)-1-(2-萘基)乙胺和氢气反应消旋，最后原料全部生成(R)-1-(2-萘基)乙胺酯化物。水解(R)-1-(2-萘基)乙胺酯化物得到(R)-1-(2-萘基)乙胺，反应式如下：

一种酶法拆分制备(R)-1-(2-萘基)乙胺的方法，该方法为包括以下步骤：

(1)固定化CALB制备：南极假丝酵母脂肪酶B酶液，以下简称CALB，往酶液中加入的环氧树脂，在25℃下搅拌3h后将树脂从酶液中分离，并用pH＝7.0缓冲洗涤，真空干燥后得到固定化CALB，酶蛋白所占固定化酶的重量百分比为1.0-3.0％；