[发明专利]一种修枝荚蒾离体组培快速繁殖方法

权利要求书

1.一种修枝荚蒾离体组培快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)组培外植体的选取与处理：选择生长健壮、无病虫害的当年生修枝荚蒾幼嫩枝条作为外植体，先用洗衣粉或洗洁精浸泡25～35min，再用自来水连续冲洗至少1h，最后用0.1％升汞灭菌4～12min，无菌水冲洗3～5次，获得无菌外植体；

(2)初代培养：将无菌外植体剪成1.5～2.5cm的带芽茎段，接种于初代培养基上，置于培养室内进行初代培养，使腋芽萌发和生长，培养时间为30天，培养条件为：每天保持光照14h，光照强度为2000Lx，培养温度为25℃；

(3)增殖培养：将经初代培养获得的芽苗转接到增殖培养基上，置于培养室内进行增殖培养，培养条件同步骤(2)，继代周期为30天，最终获得丛生芽苗；

(4)瓶内生根培养：选取高度为2～3cm、生长健壮的无根丛生芽苗转接到生根培养基上，置于培养室内进行生根培养，培养条件同步骤(2)，培养时间为至少30天，直至生根，获得瓶内生根的组培苗；

(5)炼苗移栽：选取根系生长良好、健壮的组培苗进行炼苗，首先打开组培瓶瓶盖，将其置于自然光照下炼苗3～5天，然后从组培瓶内取出组培苗，用清水洗净根部附着的培养基后移栽到消毒基质中，完成修枝荚蒾离体组培快速繁殖。

2.根据权利要求1所述的一种修枝荚蒾离体组培快速繁殖方法，其特征在于，步骤(2)中，所述初代培养基的组份及含量为：MS培养基、1.0mg/L 6-BA、0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖、8～10g/L琼脂粉，pH为5.8～6.0。

3.根据权利要求1所述的一种修枝荚蒾离体组培快速繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中，所述增殖培养基的组份及含量为：MS培养基、2.0mg/L 6-BA、0.2mg/LIBA、0.4mg/L GA₃、30g/L蔗糖、8～10g/L琼脂粉，pH为5.8～6.0。

4.根据权利要求1所述的一种修枝荚蒾离体组培快速繁殖方法，其特征在于，步骤(4)中，所述生根培养基的组份及含量为：1/2MS培养基、2.0mg/L IBA、30g/L蔗糖、8～10g/L琼脂粉，pH为5.8～6.0。

5.根据权利要求1所述的一种修枝荚蒾离体组培快速繁殖方法，其特征在于，步骤(5)中，所述消毒基质包括体积比为2:1的细河沙和草炭土。

6.根据权利要求1所述的一种修枝荚蒾离体组培快速繁殖方法，其特征在于，步骤(5)中，所述消毒基质在使用前，首先采用0.5％的KMnO₄溶液进行消毒，然后再用清水冲洗3～5次。