[发明专利]一种鲥鱼精液的保存方法

权利要求书

1.一种鲥鱼精液的保存方法，其特征在于：将抗冻剂、鲥鱼精液和稀释液按体积比1:1：5混合后，并在5℃保存；

所述稀释液体积百分比成分为：氯化钠注射液：50%，纯水：15-20%，氯化钾：7-14%，氯化钙：5-10%，碳酸氢钠：5-10%，绿原酸：1-2%，甘油：1-3%，葡萄糖：3-5%，卵磷脂：8-15%，柠檬酸钠：1-3%，链霉素：1-2%，聚谷氨酸钠：1-3%，双歧杆菌：1-3%，余量为乳酸菌；

所述抗冻剂体积百分比成分为：二甲基亚砜：30％、甘油：20％、乙二醇：30%，二甲基乙酰胺：20％。

2.根据权利要求1所述的鲥鱼精液的保存方法，其特征在于：所述稀释液体积百分比成分为：氯化钠注射液：50%，纯水：15%，氯化钾：7%，氯化钙：5%，碳酸氢钠：5%，绿原酸：1%，甘油：1%，葡萄糖：3%，卵磷脂：8%，柠檬酸钠：1%，链霉素：1%，聚谷氨酸钠：1%，双歧杆菌：1%，余量为乳酸菌。

3.根据权利要求1所述的鲥鱼精液的保存方法，其特征在于：所述稀释液体积百分比成分为：氯化钠注射液：50%，纯水：20%，氯化钾：14%，氯化钙：10%，碳酸氢钠：10%，绿原酸：2%，甘油：3%，葡萄糖：5%，卵磷脂：15%，柠檬酸钠：3%，链霉素：2%，聚谷氨酸钠：3%，双歧杆菌：3%，余量为乳酸菌。

4.根据权利要求1所述的鲥鱼精液的保存方法，其特征在于：所述稀释液体积百分比成分为：氯化钠注射液：50%，纯水：18%，氯化钾：12%，氯化钙：8%，碳酸氢钠：8%，绿原酸：1%，甘油：1%，葡萄糖：3%，卵磷脂：10%，柠檬酸钠：2%，链霉素：1%，聚谷氨酸钠：2%，双歧杆菌：2%，余量为乳酸菌。

5.如权利要求1-4中任一权利要求所述的鲥鱼精液的保存方法，其特征在于，所述稀释液的制备包括以下步骤：

（一）量取100ml纯水，于100-110℃高压灭菌10-12min，获得灭菌纯水A；

（二）称取柠碳酸氢钠、葡萄糖、柠檬酸钠、双歧杆菌、链霉素以及乳酸菌，分别加入到灭菌纯水A 中， 于55-65℃水浴加热，并进行顺时针搅拌溶解10-15min，然后于120℃高压灭菌15-20min，获得溶液B；

（三）无菌吸取新鲜卵黄液，用灭菌生理盐水进行1:1 稀释后，加入到灭菌的离心管中，于5℃ 7500g离心10-15min， 吸取氯化钠注射液10-15ml， 于15-25℃静置8-12min，获得卵黄离心上清液C；

（四）称取氯化钾以及氯化钙，分别加入到卵黄离心上清液C中，顺时针搅拌混匀，获得溶液D；

（五）取出溶液B，待其温度降到85℃以下时，称取绿原酸、甘油、卵磷脂以及聚谷氨酸钠，加入到溶液B中，并进行顺时针搅拌溶解，获得溶液E；

（六）待溶液E温度降到35-40℃时，将溶液D缓缓倒入，混匀即可。

6.根据权利要求5所述的鲥鱼精液的保存方法，其特征在于：所述稀释液的制备包括以下步骤：

（一）量取100ml纯水，于100℃高压灭菌10min，获得灭菌纯水A；

（二）称取柠碳酸氢钠、葡萄糖、柠檬酸钠、双歧杆菌、链霉素以及乳酸菌，分别加入到灭菌纯水A 中， 于55℃水浴加热，并进行顺时针搅拌溶解10min，然后于120℃高压灭菌15min，获得溶液B；

（三）无菌吸取新鲜卵黄液，用灭菌生理盐水进行1:1 稀释后，加入到灭菌的离心管中，于5℃ 7500g离心10min， 吸取氯化钠注射液10ml， 于15℃静置8min，获得卵黄离心上清液C；

（四）称取氯化钾以及氯化钙，分别加入到卵黄离心上清液C中，顺时针搅拌混匀，获得溶液D；

（五）取出溶液B，待其温度降到85℃以下时，称取绿原酸、甘油、卵磷脂以及聚谷氨酸钠，加入到溶液B中，并进行顺时针搅拌溶解，获得溶液E；

（六）待溶液E温度降到35℃时，将溶液D缓缓倒入，混匀即可。