[发明专利]一种鹰嘴豆乳内产GABA的乳酸菌菌株的筛选方法

说明书

本发明公开了一种鹰嘴豆乳内产GABA的乳酸菌菌株的筛选方法，步骤如下：1)鹰嘴豆乳样品前处理；2)纸层析法分离氨基酸；3)产GABA的乳酸菌的初次判断；4)产GABA的乳酸菌的二次判断；5)产GABA的乳酸菌的形态学鉴定；6)产GABA的乳酸菌的生理生化试验；7)16SrDNA序列鉴定产GABA的乳酸菌的菌株。本发明通过在高效液相色谱仪检测2号混合液的时候，将2号溶液分为两个部分，先检验其中一部分的溶液将数据记录下来，另一部分混合液静置20‑24h后再次进行检测，将数据记录下来，对比前后检测的数据，静置后的溶液内的GABA量明显增加，从而确定鹰嘴豆乳内部存在产GABA的乳酸菌的菌株，减少实验误差，为开发富含GABA的功能性食品打下基础。

技术领域

本发明涉及一种乳酸菌菌株的筛选方法，尤其涉及一种鹰嘴豆乳内产GABA的乳酸菌菌株的筛选方法。

背景技术

鹰嘴豆，为蝶形花科草本植物，别名桃尔豆、鸡豆、鸡心豆等，是印度和巴基斯坦的重要的五谷之一，在欧洲食用鹰嘴豆也十分普遍，也是维吾尔医常用药材。鹰嘴豆因其面形奇特，尖如鹰嘴，故称此名。鹰嘴豆为豆科草本植物，起源于亚洲西部和近东地区。是世界上栽培面积较大的豆类植物，约一亿五千万亩，其中印度和巴基斯坦两国的种植面积占全世界的80％以上，中国只有零星分布。鹰嘴豆的淀粉具有板栗香味。将鹰嘴豆做成鹰嘴豆乳可以易于吸收消化，是婴儿和老年人的营养食品，鹰嘴豆乳内部包含GABA，中文名称γ-氨基丁酸，又叫氨酪酸，是一种非蛋白质组成的天然氨基酸，为哺乳动物中枢神经系统中最重要的抑制性神经递质，具有重要的生理功能：如降血压作用；改善脑机能，延长记忆力；镇静神经，抗焦虑作用；改善肝功能；活化肾功能，降低胆固醇。GABA除具有上述的生理作用外，还有调节激素分泌，改善更年期综合症，促进酒精代谢、消臭、高效减肥、诱发人精子顶体、促进动物的抗病和生长等功能。另外，大量研究证明，GABA的缺乏将导致癫痫病的发生，因此在饮食中适当补充GABA对由于GABA的缺乏引起的癫痫病有一定预防作用。由于其特殊生理功能，GABA已经成为一种新型功能性因子，正被广泛用于食品保健、医药、化工和农业等行业，具有广阔的应用前景。

传统的鹰嘴豆乳内产GABA的乳酸菌菌株的筛选只是简单地提取一小部分样品进行试验鉴定出鹰嘴豆乳内部含有GABA，无法确定是否存在产GABA的乳酸菌菌株，而且传统的鉴定方式没有经过多次检测，导致鉴定不科学。

发明内容

本发明的目的是提供一种鹰嘴豆乳内产GABA的乳酸菌菌株的筛选方法，解决传统方法鉴定不科学，无法确定鹰嘴豆乳内部存在产GABA的乳酸菌菌株的问题。

为了达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

一种鹰嘴豆乳内产GABA的乳酸菌菌株的筛选方法，包括如下步骤：

1)制备鹰嘴豆乳块与水的混合液；

2)采用纸层析法分离混合液中的氨基酸；

3)使用高效液相色谱仪判断混合液中产GABA的乳酸菌；

4)对混合液中产GABA的乳酸菌进行形态学鉴定；

5)对混合液中产GABA的乳酸菌进行生理生化试验；

6)使用16SrDNA序列鉴定混合液中产GABA的乳酸菌的菌株；

7)对步骤2)至6)的检测结果进行对比分析，筛选出混合液中产GABA的乳酸菌菌株。

优选的，步骤1)中，将鹰嘴豆乳块与水混合，并搅拌均匀后，在25～40℃的环境中静置10min。