[发明专利]一种鉴别阿胶及含阿胶制品中猪皮源性成分的多肽有效
申请号: | 201811243273.3 | 申请日: | 2018-10-24 |
公开(公告)号: | CN109280077B | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 张晓梅;张鸿伟;王培锋;徐彪;赵雪 | 申请(专利权)人: | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K7/08;C07K14/00;G01N27/62 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 唐宁 |
地址: | 266002 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴别 阿胶 制品 猪皮 成分 多肽 | ||
1.一条多肽在制备检测阿胶及含阿胶制品中猪皮源性成分的检测产品中的应用,所述的含阿胶制品包括阿胶糕、阿胶膏、阿胶浆、阿胶口服液、阿胶糖、阿胶补血颗粒,所述的多肽的序列为:
肽段36:SEQ ID NO.36:VIQLEAK;
所述的检测为从驴皮阿胶、猪皮胶、牛皮胶、马皮胶、骡皮胶样本中检测样本中是否包含猪皮胶。
2.一种检测阿胶及含阿胶制品中是否含有猪皮源性成分的检测方法,所述方法包括如下步骤:
步骤(1),对待测样本进行质谱前处理,获得待测多肽滤液:
步骤(2),通过质谱法检测步骤(1)获得的多肽滤液,检测待测样本中是否含有权利要求1所述肽段的质谱峰;
步骤(1)所述的对待测样本进行质谱前处理,获得待测多肽滤液的步骤如下:
(1)将待测样品均质成粉末状态,称取0.1g~0.5g阿胶样品或1.0~2.0g含阿胶制品,加入1% NH4HCO3溶液,超声处理10~30min使样品完全溶解,定容至50mL;
(2)溶液过0.22µm滤膜得到滤液;
(3)取10~20µL1µg/µL的Trypsin酶溶液加入到100µL~200µL的上述滤液中,37℃酶解16-18小时,待上机检测;
步骤(2)通过质谱法检验步骤(1)获得的多肽滤液的方法是下述方法A或方法B:
方法A:采用AB SCIEX TripleTOF® 5600质谱检测多肽滤液中是否含有权利要求1所述的肽段的质谱峰,
上机参数为:
流动相A:0.05~0.2% 甲酸-乙腈溶液,流动相B:0.05~0.2%甲酸-水,
流速:0.1~0.5mL/min,
TOF扫描范围:100-3000Da,
正离子反应模式,GS1:35,GS2:45,Curtain Gas:35,ISVF:5500,TEM:500,DP:100,CE:10;
方法B:采用AB SCIEX 三重四级杆质谱检测多肽滤液中是否含有权利要求1所述的肽段的质谱峰,
上机参数为:
流动相A:0.05~0.2%甲酸-乙腈,流动相B:0.05~0.2%甲酸-水,
流速:0.1~0.5mL/min,
电喷雾离子源,正离子反应模式,检测方式:MRM,喷雾电压:5500V,离子传输管温度:475℃;鞘气压力:40;辅助气压力:6。
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