[发明专利]保留时间对齐/校正用内标物、内标液、方法和试剂盒

说明书

本申请公开了一种保留时间对齐/校正用内标物、内标液、方法和试剂盒；其中，所述内标物选自5‑氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4‑叔丁基苯酚、2,4‑二叔丁基苯酚中的至少一种。本申请所述保留时间对齐/校正方法操作过程简单易控，保留时间分散。

技术领域

本申请涉及一种保留时间对齐/校正用内标物、内标液、方法和试剂盒，属于分析化学领域。

背景技术

组学、生物信息学等生物大数据分析需要通过大量甚至海量数据获得生物学相关发现。实验结果通常存在着实验间的变异和实验内的变异。一般来说，实验间的变异比实验内变异的量级要高。

在分析检测过程中，由于多种因素的影响，原始色谱图容易出现谱峰漂移和一些系统偏倚。这些误差很大程度上来源于色谱柱本身的影响(色谱柱老化，填充不均匀，柱内残留污染物等)。即使实验条件完全平行，这些误差也难以避免；即使使用相同的实验条件和样品，更换色谱柱色谱图也会产生差别。其次，一些实验条件(温度、洗脱梯度等)很难控制也是色谱保留时间偏差的主要原因之一。另外，仪器误差(死体积，流速变化，基线漂移等)也会对保留时间造成很大影响。谱峰漂移使谱图变得复杂，给化合物归属、定量、模式识别、数据挖掘等分析带来困难。因此谱峰保留时间的对齐与校正成为生物大数据分析预处理过程中的一个关键步骤。LC-MS谱图对齐与校正不但可以消除实验间的色谱分离分析误差，而且使不同时间、不同实验室产生的LC-MS结果进行同时比较成为可能。

生物样本(血浆、尿液、中药提取物、复方制剂等)作为典型的复杂体系，化学成分极其复杂。众多成分的理化性质不同，含量差别巨大。实验中各有实验因素对不同性质的化合物的色谱保留影响不尽相同。成分间极性的差异使得它们的保留时间覆盖整个色谱分离过程。实际分析中待分析样本可能没有共同化合物或者共同化合物色谱保留时间不够分散。目前尚未有商品化的用于液质联用仪负离子模式的保留时间内标试剂盒。

发明内容

根据本申请的一个方面，提供了一种保留时间对齐/校正用内标物和内标液，该内标物和内标液能有效进行液质联用仪负离子模式下色谱保留时间对齐/校正。

具体地，本申请中采用极性差别显著、色谱保留时间阶梯式增加的物质作为保留时间内标。

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种用于液质联用仪负离子模式的保留时间内标组合物、方法和试剂盒。使用这些内标物可以准确、方便对齐/校正液质联用仪负离子模式的数据。

所述保留时间对齐/校正用内标物，其特征在于，包含5-氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4-叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚中的至少一种。

可选地，所述内标物包含5-氟尿嘧啶，没食子酸，原儿茶酸，间硝基苯酚，4-叔丁基苯酚和2,4-二叔丁基苯酚。

本申请的又一方面，提供了一种保留时间对齐/校正用内标液，其特征在于，包含上述所述的内标物中的至少一种。

可选地，所述保留时间对齐/校正用内标液，包含内标物；其中，所述内标物选自5-氟尿嘧啶、没食子酸、原儿茶酸、间硝基苯酚、4-叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚中的至少一种。

可选地，所述保留时间对齐/校正用内标液，包含内标物；其中，所述内标物包含5-氟尿嘧啶，没食子酸，原儿茶酸，间硝基苯酚，4-叔丁基苯酚和2,4-二叔丁基苯酚。

可选地，所述内标液还包括溶剂；其中，所述溶剂溶解所述内标物。

可选地，所述溶剂可以使用任何适合的溶剂。

可选地，所述溶剂包含乙腈、水、甲醇、乙醇中的至少一种。

可选地，所述溶剂选自乙腈、水、甲醇、乙醇中的至少一种。

可选地，所述溶剂选自乙腈、水、甲醇、乙醇中的至少两种以任意比例混合得到的混合物。