[发明专利]一种促进芽孢生成的培养基

说明书

本发明涉及一种促进芽孢生成的培养基，所述培养基包括如下重量份的组分：玉米粉：3‑5，蛋白胨：0.3‑0.5，豆粕粉：2‑3，镁盐：0.01‑0.03，氯化物：0.001‑0.01，钾盐：0.01‑0.03，钙盐：0.01‑0.05，锰盐：0.003‑0.005。所述培养基用作液体发酵培养基使用。与现有技术相比，本发明培养基能够有效缩短芽孢生成的时间，操作简易，并显著提高芽孢产率。

技术领域

本发明涉及一种培养基，尤其是涉及一种促进芽孢生成的培养基。

背景技术

枯草芽孢杆菌作为益生菌在微生物发酵领域被广泛运用。枯草芽孢杆菌在动物体内能够促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH值，间接抑制其它致病菌生长；能够提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力；合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用，能够平衡肠道的菌群的组成，改善肠道健康。

在工业生产中，枯草芽孢杆菌的发酵主要有固体发酵与液体发酵，固体发酵相对而言比较稳定，但对菌量有一定限制，液体发酵能够使菌量得到大大提升，形成高菌量，但是高菌量不代表高芽孢，在液体发酵中没有形成芽孢的菌体会在喷雾干燥中大部分死亡，并且在菌粉中若芽孢率低，没有形成芽孢的菌体会在短时间内死亡，大大降低了菌粉中菌的含量以及保证其稳定性。因此，保证在液体发酵中芽孢所占比例，具有重大意义。

中国专利CN201510174012.0公开了一种类芽孢杆菌细菌素制剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)将类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)接种于培养类芽孢杆菌的培养基中，震荡发酵培养获得发酵液，将所得发酵液离心取上清液；(2)将所得上清液与乙醇混合，乙醇与上清液混合的体积比为2：1～4：1，将所得混合液静置，静置的温度为2～10℃，静置的时间为12～36小时，将混合液离心收集沉淀物，除去溶剂即得。所述培养基的配方较佳地为：氮源1～3％、碳源1～10％、L-胱氨酸0.01～0.03％、硫酸钠0.01～0.03％、Na2HPO4·12H2O 0.1～0.3％、乙酸钠1～3％、氯化钠0.05～0.15％、碳酸氢钠0.1～0.3％，余量为水。

中国专利CN201810095745.9公开一种解淀粉芽孢杆菌G5芽孢菌粉的制备方法，一、制备产芽孢培养基，产芽孢培养基组分为：玉米淀粉、葡萄糖、豆粕、碳酸钙、氯化铵、磷酸氢二钾、硫酸镁和硫酸锰；二、培养芽孢发酵液；三、制备芽孢菌粉，向所述芽孢发酵液中添加硫酸铵和硅藻土；然后进行板框过滤；得到解淀粉芽孢杆菌G5的芽孢菌粉。借此，本发明提供的解淀粉芽孢杆菌G5芽孢菌粉的制备方法中，产芽孢培养基原料常见，方便易得，降低了生产成本；得到的芽孢发酵液中芽孢数量多，芽孢率≥98％；以硫酸铵和硅藻土作为絮凝剂，缩短芽孢菌粉制备的时间，得到的芽孢菌粉中有效活菌数多，有效活菌的收率≥95％。产芽孢培养基各组分为：玉米淀粉10～40g/L、葡萄糖0.5～3g/L、豆粕5～25g/L、碳酸钙0.1～1.5g/L、氯化铵0.1～1.0g/L、磷酸氢二钾0.1～1.0g/L、硫酸镁0.01～0.7g/L和硫酸锰0.01～0.7g/L。

上述两个专利涉及的培养基主要是制备菌制剂或菌粉，并没有特殊的促进芽孢杆菌产芽孢率的功能。

中国专利CN102181389A公开了一种选育高产芽孢率芽孢杆菌的方法，该方法是根据芽孢的热稳定性特点，采用逐级加热处理后培养的手段，选育出高产芽孢率的芽孢杆菌。其步骤包括：芽孢杆菌激活、一级加热处理、一级培养、二级加热处理、二级培养、三级加热处理、三级培养与收集，得到所述高产芽孢率芽孢杆菌。上述方法虽然提高了芽孢杆菌的产芽孢率，但是此方法需要较长的培养时间，由激活并经过三级培养，每次至少3-5天，培养一次至少需要2周的时间，拉长了培养驯化的时间，并且经过培养后，还需要进行不同程度的热处理，需要谨慎的设置温度和时间，增加了控制成本。