[发明专利]一种螺旋藻多糖的制备方法及其应用

说明书

本发明属于生物与新医药中轻工和化工生物技的天然产物有效成份的分离提取技术，涉及提取与应用领域，具体为一种螺旋藻多糖的提取方法及其在抗肿瘤方面的应用。本发明的制备步骤如下：1）将干燥的螺旋藻粉碎，过筛；2）加入氢氧化钠溶液，微波辅助提取；3）将提取液离心，滤液用稀盐酸调pH值；4）加三氯乙酸沉淀蛋白，收集滤液；5）向滤液中加入乙醇沉淀多糖，离心；6）将离心所得多糖真空干燥。本发明采用微波辅助的碱性溶液提取技术，节约提取时间，提高提取率；选用三氯乙酸沉淀蛋白，既可沉淀蛋白也可去除少量色素等杂质，提高纯度。采用该方法制备的螺旋藻多糖提取物对HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用。

技术领域

本发明属于生物与新医药中轻工和化工生物技的天然产物有效成份的分离提取技术，涉及提取与应用领域，尤其涉及一种螺旋藻多糖提取物的制备方法及其在抗肿瘤方面的应用。

背景技术

螺旋藻是一类低等植物，属于蓝藻门颤藻科。螺旋藻富含优质蛋白质、多糖、矿物质及多种生物活性物质，且易消化吸收，堪称最佳天然绿色保健食品，被联合国粮农组织推荐为21世纪最理想的保健食品。螺旋藻多糖是从螺旋藻中分离提取的一种生物活性物质，具有促进细胞生长、提高免疫力、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗疲劳等功能，且无毒副作用。传统螺旋藻多糖的提取工艺复杂，提取率低，因此如何选取最佳的提取工艺成为本次专利研究重点。本发明结合传统工艺，采用碱性溶液辅助微波进行提取，节约了提取时间，提高了提取率。选用三氯乙酸沉淀蛋白和去除少量色素等杂质，并通过细化工艺参数提高多糖纯度。提取获得的螺旋藻多糖进行抗肿瘤活性实验，评价螺旋藻多糖提取物在抗肿瘤方面的作用。

发明内容

本发明提供了螺旋藻多糖提取物的制备方法与应用，本发明将传统工艺与现代工艺结合，细化工艺参数，在浸提时辅助微波提取，其工艺具有选择性高、操作时间短、溶剂消耗小、有效成分收率高的特点。

为了实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：

一种螺旋藻多糖提取物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将螺旋藻于40℃烘干、采用万能粉碎机将其粉碎，过30目筛网，得到螺旋藻粉末；

（2）向螺旋藻粉末中加入氢氧化钠溶液，升温搅拌，微波辅助提取，得到提取液；

（3）将提取液离心，滤液用稀盐酸调节pH值；

（4）向滤液中加入三氯乙酸溶液沉淀蛋白质，离心，再次向滤液中加入三氯乙酸溶液，离心，取滤液；

（5）向滤液中加入乙醇溶液，搅拌后离心，取沉淀物；

（6）将沉淀物真空干燥得螺旋藻多糖提取物。

优选的，所述步骤（2）中加入螺旋藻粉末与氢氧化钠溶液的料液体积比为1:10~1:15g/ml。

优选的，所述步骤（2）中采用的氢氧化钠溶液pH值为9.0~12.0。

优选的，所述步骤（2）中采用微波辅助氢氧化钠溶液进行提取，提取温度为70~90℃，提取功率400~600W，提取时间为1~3min。

优选的，所述步骤（3）中采用的稀盐酸浓度为10%，调节pH值至7.0。

优选的，所述步骤（4）中的滤液与三氯乙酸溶液的料液体积比为1:5~1:10。

优选的，所述步骤（4）中三氯乙酸溶液浓度为4%~6%。

优选的，所述步骤（5）中的滤液与乙醇溶液料液体积比为1:3~1:5。

优选的，所述步骤（5）中乙醇溶液浓度为70%~90%。

优选的，所述步骤（6）中的沉淀物采用真空干燥箱烘干，干燥温度40~60℃，干燥时间为18~32小时。