[发明专利]一种磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒

权利要求书

1.一种磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒，其包括：裂解液以及磁珠，其特征在于：所述裂解液组成成分为：20-100mmol/L的盐酸胍、10-50mmol/L的PH为8.0的Tris缓冲溶液、50-250mmol/L的KCl溶液、10-100mmol/L的PH为8.0的EDTA螯合剂以及体积含量为0.1％-1％SDS亲水基表面活性剂。

2.根据权利要求1所述的一种磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒，其特征在于：所述裂解液组成成分为：30-90mmol/L的盐酸胍、20-40mmol/L的PH为8.0的Tris缓冲溶液、60-240mmol/L的KCl溶液、20-90mmol/L的PH为8.0的EDTA螯合剂以及体积含量为0.2％-0.9％SDS亲水基表面活性剂。

3.一种如权利要求1-2任一所述的磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒的使用方法，其特征在于包括以下步骤：口腔拭子取样品、裂解液洗脱拭子上细胞并将含细胞液体转移至离心管、蛋白酶K消化、磁珠纯化、75％乙醇溶液洗涤以及含Nuclease free water的低盐缓冲液洗脱。

4.根据权利要求3所述的一种磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒的使用方法，其特征在于：所述口腔拭子取样品实施方式为：将在口腔内擦拭过的拭子或者棉签转置于1.5mL的离心管中，将拭子剪下或者使其脱落；所述裂解液洗脱拭子上细胞并将含细胞液体转移至离心管实施方式为：往装有口腔拭子样品中的离心管中加入300uL裂解液，震荡混匀离心，将液体转移至新的1.5mL离心管中得混合液一。

5.根据权利要求4所述的一种磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒的使用方法，其特征在于：所述蛋白酶K消化实施方式为：往混合液一中加入10uL蛋白酶K，吹打混匀，在56℃，800rpm的转速的条件下孵育30min得混合液二；所述磁珠纯化实施方式为：混合液二室温放置5min后，12000rpm离心转速条件下离心2min，将200uL上清液转移至含100uL结合磁珠的1.5mL离心管中，涡旋混匀，室温静置孵育5min，短离，将离心管置于磁力架上至溶液澄清。

6.根据权利要求5所述的一种磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒的使用方法，其特征在于：所述75％乙醇溶液洗涤实施方式为：移除上清液，向离心管中加入500uL 75％乙醇溶液，剧烈Vortex，磁力架上30s，重复该步骤一次，即75％乙醇溶液洗涤步骤实施两次，短离，使用移液器移除底部残留乙醇溶液，室温静置2-5min，至磁珠不反光。

7.根据权利要求6所述的一种磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒的使用方法，其特征在于：所述含Nuclease free water低盐缓冲液洗脱实施方式为：加入20-50uL的含Nuclease free water低盐缓冲液，把离心管从磁力架取下，重悬磁珠，室温静置5min，将离心管置于磁力架上2min，用移液器吸取上清液，转移到新的1.5ml离心管中。