[发明专利]一种用于辅助诊断SCA3/MJD的外泌体生物标志物及其筛选鉴定方法

权利要求书

1.一种用于辅助诊断SCA3/MJD的外泌体生物标志物，其特征在于，所述外泌体生物标志物为外泌体来源的novel-mir-7014,所述novel-mir-7014的核苷酸序列SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的用于辅助诊断SCA3/MJD的外泌体生物标志物的筛选鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

1） 收集血浆、脑脊液样本，并提取样本中的外泌体及外泌体RNAs，并鉴定外泌体；

2） 应用sRNA Seq技术对步骤1）提取得到的外泌体Small RNAs进行测序，并筛选出差异性表达的miRNAs；

3） 扩大收集血浆样本，并提取样本中的外泌体RNAs；

4） 采用qPCR分析方法检测miRNAs的相对表达水平，对筛选的miRNAs进行验证性评估。

3.如权利要求2所述用于辅助诊断SCA3/MJD的外泌体生物标志物的筛选鉴定方法，其特征在于，在步骤2）和3）之间还包括对novel-mir-7014进行GO注释和KEGG代谢通路分析。

4.如权利要求2所述用于辅助诊断SCA3/MJD的外泌体生物标志物的筛选鉴定方法，其特征在于，步骤4）中qPCR分析方法的具体操作为：

a）制备逆转录的反应混合液，将miRNAs逆转录为cDNAs；

b）通过Primer 5设计引物；

c）制备qPCR反应体系，使用U6作为标准化内参，进行qPCR分析，采用-△CT法进行miRNAs的相对表达含量分析。

5.如权利要求4所述用于辅助诊断SCA3/MJD的外泌体生物标志物的筛选鉴定方法，其特征在于，所述novel-mir-7014的正向引物的序列为CCTGTGTTCCTGAGCCTTG。

6.如权利要求1-5任一项所述用于辅助诊断SCA3/MJD的外泌体生物标志物在制备SCA3/MJD辅助诊断试剂盒中的应用。