[发明专利]一种组合物和复合校准品及其应用

说明书

本发明属于生物分子体外诊断技术领域，具体涉及一种组合物和复合校准品及其应用。本发明所提供的组合物，包括以下重量组分：甘油0.5～10份；二丁基羟基甲苯0.01～3份；增效剂0.01～1份；表面活性剂0.01～2份。甘油为稳定剂，具有保护液和脱水保护液的作用，能够对叶酸抗原起到很好的保护作用；二丁基羟基甲苯为抗氧化剂，能够与自动氧化过程中产生的链增长自由基反应，消灭自由基，避免叶酸的氧化；表面活性剂可以替代水与叶酸的亲水基团形成氢键，维持叶酸的空间结构稳定及避免凝聚；增效剂与抗氧化剂混合使用，可提高抗氧化效果，更好地阻止或延缓叶酸氧化。各组分协同增效，共同提高了叶酸的稳定性并延长贮存期。

技术领域

本发明属于生物分子体外诊断技术领域，具体涉及一种组合物和复合校准品及其应用。

背景技术

叶酸(folic acid)也称维生素B9，是一种水溶性B族维生素，是肌体正常细胞生长和DNA合成的重要必需维生素，许多食物都含有叶酸，食物中叶酸进入人体后，被还原成具有生理作用的活性形式四氢叶酸(tetrahydrofolic acid，THFA)，它是体内生化反应中一碳基团的传递体。叶酸携带一碳基团形成N5-甲基THFA、亚甲基THFA等参与嘌呤和胸腺嘧啶的合成，进一步合成DNA和RNA。参与甘氨酸和丝氨酸之间、组氨酸和谷氨酸之间、半胱氨酸和蛋氨酸之间的相互转化，并参与许多重要物质的合成，如血红蛋白、肾上腺素、胆碱、肌酸等。叶酸缺乏会引起以巨幼红细胞性贫血为特征的临床综合征，当叶酸缺乏时，DNA合成障碍，从而使迅速分裂的造血系统和胃黏膜发生病变，可并发神经系统损伤。因而，叶酸检测对诊断巨幼细胞贫血的病因具有重要价值。

目前，存在多种叶酸检测方法，包括微生物法、放射免疫分析法、色谱分析法、酶联免疫法、化学发光免疫分析法、色谱一质谱检测法等。由于叶酸在人体内的含量极少，稳定性比较差，且其具有生物活性的化合物构成成分比较复杂，加大了叶酸准确分析的难度。化学发光免疫分析法因其具有较高的灵敏度和特异性，检测迅速，近年来已逐渐成为叶酸检测的主要方法之一。

现有基于化学发光免疫分析法的叶酸测定试剂盒一般包括校准品，用于校正并验证实验结果的准确程度。校准品常为液体或冻干品，其包括叶酸和基质，叶酸在液态下容易发生变性，导致检测结果不稳定。虽然能够通过加入一些保护液(比如蛋白、抗氧化剂或表面活性剂等)，来延长叶酸在液态下的保存时间，然而据统计，其在避光、2～8℃条件下的保质期也仅为3～4个月。为了提高校准品的稳定性，部分厂家采用冻干品的形式，冻干后的叶酸冻稳定时间长，但冻干工艺复杂，批次差异大，且大部分试剂盒使用的叶酸校准品，复溶后储存时间短，2～8℃条件下只能存放1天。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明实施例的主要目的在于提供一种组合物，以作为叶酸保护制剂，旨在解决现有叶酸校准品容易变质，贮存稳定性差等技术问题。

本发明实施例的次要目的在于提供一种复合校准品，以及提供上述组合物或复合校准品在叶酸检测中的应用，用于提高叶酸检测的稳定性，降低叶酸准确分析的难度。

为了实现上述发明目的，一方面，本发明提供了一种组合物，包括以下重量组分：

与现有技术相比，本发明组合物以甘油作为稳定剂，甘油具有保护液和脱水保护液的作用，能够对叶酸抗原起到很好的保护作用；二丁基羟基甲苯作为抗氧化剂，能够与自动氧化过程中产生的链增长自由基反应，消灭自由基，避免叶酸的氧化；表面活性剂可以替代水与叶酸的亲水基团形成氢键，维持叶酸的空间结构稳定及避免凝聚；增效剂与抗氧化剂混合使用，可提高抗氧化效果，更好地阻止或延缓叶酸氧化，提高叶酸的稳定性并延长贮存期。经实验检测，本发明甘油、二丁基羟基甲苯、增效剂和表面活性剂之间协同增效，将其作为一种叶酸保护制剂与叶酸混合保存，大大延长了叶酸的保存时间，提高了叶酸的贮存稳定性。

另一方面，本发明提供了一种复合校准品，包括：叶酸和叶酸保护制剂；所述叶酸保护制剂包括以下重量组分：