[发明专利]具有高凝胶强度、高粘度、高酰基的结冷胶的制备方法

权利要求书

1.具有高凝胶强度、高粘度、高酰基的结冷胶的制备方法，其特征在于，所述包括如下工艺步骤：

A、将鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)CGMCC No.14238按照10％-20％的接种量将其接种到灭菌后且含有碳源、氮源及必要营养物质的高碳氮比发酵培养基中；

B、调节发酵培养基的pH＝7.0-7.5，在温度为35℃-37℃，通风量为0.3vvm-0.8vvm的条件下进行通气发酵；

C、发酵20-30小时补入无菌水及携氧剂；其中补入无菌水及携氧剂的工艺条件为：发酵20-30小时补入占发酵液体积3％-5％的无菌水以及占发酵液体积0.3％-0.6％的携氧剂，所述的携氧剂选自双氧水、吐温20中的一种或其结合；

D、当培养液粘度不再增长或发酵周期≤50小时发酵结束；

E、发酵结束后将发酵液经后提取制备成具有高凝胶强度、高粘度、高酰基的结冷胶；

所述的步骤A、B中发酵培养基由如下质量百分含量的原料组成：

葡萄糖或麦芽糖3％-4％；

大豆分离蛋白0.1％-0.3％；

硝酸钠0.1％-0.2％；

碳酸钙0.1％-0.15％；

磷酸二氢钾0.1％-0.25％；

有机硅消泡剂0.05％-0.15％；

余量为无菌水；

所述的步骤E的工艺条件如下：

将步骤D中发酵结束后的发酵液用质量百分比为10％-20％的酸溶液调pH＝5.0-6.0，将调整pH＝5.0-6.0的发酵液加热至70-80℃，当发酵液冷却至60℃以下时，先加入发酵液体积1/2、质量百分比浓度为85％-95％的醇溶液搅拌均匀，再加入发酵液体积1.5倍、质量百分比浓度为85％-95％的醇溶液，使结冷胶脱水析出，经离心、干燥、粉碎后制成具有高凝胶强度、高粘度、高酰基的结冷胶；醇溶液选用乙醇溶液或异丙醇溶液；

其中，

采用高碳氮比培养基，在高温条件下对鞘氨醇单胞菌(Sphingomonassp.)CGMCCNo.14238进行培养，在发酵过程中补入无菌水及携氧剂，微生物生长代谢速度快，缩短发酵周期在50h以内，产物纯度及收率高，能得到高品质结冷胶，高温培养同时减少了降温水的利用；

发酵过程中连续补入无菌水和携氧剂，在菌种对数生长期增加溶氧，有利于种子的生长和结冷胶的合成；

提取过程中醇加量阶梯控制：萃取时醇的加入分两次加入，第一次加入少量的醇，使结冷胶与醇充分接合，有利于结冷胶纤维的析出，减少包浆的形成，提高了结冷胶的溶解速度，第二次加醇同时降低了发酵液温度，减少了醇的挥发；

采用弱酸条件下预处理及提取，有利于防止结冷胶酰基的脱落；

最终得到的结冷胶测定如下：

结冷胶酰基含量大于9％；

0.5％水溶液最终粘度达8000cp以上；

凝胶强度达800g/m²以上。

2.根据权利要求1所述的具有高凝胶强度、高粘度、高酰基的结冷胶的制备方法，其特征在于，步骤E中的酸溶液选用盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、醋酸溶液中的一种或其结合。