[发明专利]一种快速筛查紫藤三叶青与青藤三叶青药材的方法

权利要求书

1.一种快速检测紫藤三叶青与青藤三叶青药材的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将待区分的三叶青药材打粉过筛制成供试样品；

2）取步骤1）的供试样品，加入10-20倍量50-70％乙醇，超声提取20-40分钟，得供试样品溶液，随后进行UPLC-MS-MS 系统分析，得到供试样品对应的质谱数据；

3）将步骤2）采集的数据直接导入至质谱分析软件，然后进行数据分析，针对供试样品进行色谱峰提取和质谱信息表征；

4）根据步骤3）获得的供试样品的色谱信息和质谱信息，通过色谱的峰面积和出峰保留时间对应的准分子离子峰的质量数以及二级质谱信息，判断供试样品中是否含有用于区分紫藤三叶青与青藤三叶青的山柰酚-3-O-β-D-呋喃芹糖-7-O-α-L-鼠李糖苷和山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖-3-O-β-D- 吡喃葡萄糖苷；

所述紫藤三叶青和青藤三叶青的色谱信息和质谱信息根据主成分分析的分析结果显示紫藤三叶青和青藤三叶青可以完全的分离；

步骤2）中，所述UPLC-MS-MS 系统的分析条件为：

色谱条件：Waters ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱，2.1×100 mm，1.7μm；以0.1％甲酸-水为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱如下表所示：

时间/min	流动相A/%	流动相B/%
0	98%	2%
8	60%	40%
10	10%	90%

流速：0.3ml/min；柱温为30℃；检测波长为254 nm；

质谱条件：

MS 系统:ACQUITY UPLC-TQD-MS 三重四级杆质谱仪器；串联质谱仪器的使用条件为：离子化模式: ESI 负离子检测模式；检测方式：多反应检测；毛细管电压：3.0Kv；锥孔电压：38V；源温120℃；去溶剂温度：350℃；去溶剂流速：500L/hr；锥孔气流速：50L/hr；碰撞能量：19ev；驻留时间：0.2s；全扫描：扫面范围为分子量100～1000。

2.根据权利要求1 所述的一种快速检测紫藤三叶青与青藤三叶青药材的方法，其特征在于， 步骤4）中的山柰酚-3-O-β-D-呋喃芹糖-7-O-α-L-鼠李糖苷：分子量为726，分子式C₃₂H₃₈O₁₉，二级质谱碎片为647.5, 527.4, 486.6, 431.9,392.1, 289.7。