[发明专利]一种PBMC细胞的制备方法

说明书

本发明提供了一种PBMC细胞的制备的方法，所述方法采用制备细胞的设备，利用称重传感器替代光栅，并增加了进气装置和液体传感器，本发明通过优化整体设备中各装置的连用关系，简化设备操作流程，各装置各步骤相互配合，降低了生产成本，使得细胞分离过程更加智能自动化，操作更加简便，减少细胞污染，提高了PBMC细胞制备的成功率，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种PBMC细胞的制备的方法。

背景技术

细胞治疗是一种从人或者动物的组织、血液等，分离提取其中一部分细胞，直接回输给人或者动物，或者将提取的部分细胞通过筛选、基因修饰、诱导分化、培养扩增等手段，再回输给人或者动物的一种治疗方式。细胞免疫治疗方法是近年快速发展的针对多种疾病的细胞治疗方法，通过回输体外筛选、修饰、诱导、扩增的组织或血液中的淋巴细胞达到治愈疾病的目的。常见应用包括制备树突状细胞(DC)，T细胞、NK细胞治疗癌症；制备Treg细胞治疗自身免疫疾病和治疗不孕不育、过敏、病毒感染等多种疾病。

细胞制备指细胞治疗过程中所使用细胞的制备过程；以用于癌症治疗的杀伤性T细胞为例，一般可以分为外周血采集→外周血单个核细胞(PBMC)分离→特定种群淋巴细胞分离→细胞激活→细胞孵育→病毒转染→细胞扩增→细胞洗涤后制剂→细胞回输等多个步骤；根据不同的技术原理和临床应用需求，上述过程步骤可进行适当组合和调整，比如细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗的过程可以总结为：外周血采集→PBMC细胞分离→细胞激活→细胞孵育→细胞扩增→细胞洗涤后制剂→细胞回输；嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法是目前细胞治疗技术手段较为先进和复杂的代表，CAR-T细胞的制备需要完成前述细胞制备的大部分或者全部过程。由于CAR-T技术面世不久且工艺复杂，市面上缺少为其专门开发优化的自动化设备，所以目前大部分的CAR-T治疗临床研究的细胞制备过程还是以类似实验室的手工制备方法为主。随着细胞治疗产业的发展，细胞制备的一致性得到越来越多的关注，如何能克服开放式的手工制备操作所造成的微生物污染和样品间的交叉污染问题，以及由于不同操作技术人员的熟练度所造成的批间差问题，是推动细胞治疗技术面向临床最后能达到细胞药品制备标准的重要基础；因此使用自动化设备单独完成细胞制备过程中的每一个步骤并且达到最小的、稳定的批间差，将是完成细胞治疗技术向细胞药品制备标准迈进的重要手段。