[发明专利]一种植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8及其在烟草黑胫病防治中的应用

说明书

本发明公开了一种植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1‑8及其在烟草黑胫病防治中的应用，所述植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1‑8保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，430072，保藏日期2018年08月27日，保藏编号CCTCC NO:M 2018569。本发明提供的植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1‑8可以用于制备防治烟草黑胫病的微生物菌剂，制备的微生物菌剂能高效防治烟草黑胫病，且具有使用成本低、无残留、对人畜安全的特点。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体地说，涉及一种植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8及其在烟草黑胫病防治中的应用。

背景技术

烟草黑胫病是由烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)侵染烟草根和茎基部而引起的一种土传病害。该病原菌可以危害烤烟、晾烟、晒烟、白肋烟、香料烟等所有栽培烟草，破坏力极强。烟草黑胫病平均发病率为10％-15％，发病率高的田块可达到75％,发病严重的烟田甚至造成绝收。每年烟草黑胫病在我国的发病面积约76372hm²，经济损失高达1.3亿元；烟草黑胫病在全世界各大烟区均有发生，在温带、亚热带和热带烟区发生尤为猖獗，给烟草种植业造成了巨大损失。

目前，对烟草黑胫病的防治仍然以化学防治为主，但生物防治因其独特的安全性而被重视，发掘新的生防资源并研发高效生物农药对烟草黑胫病的防治和绿色烟叶生产尤为重要。与传统的化学农药相比，微生物源农药具有很多优点，尤其是在环境相容性和安全性方面的优势尤为明显，如对环境无污染、无残留、对人和家畜无危害等。微生物源农药被认为是传统化学农药的有效替代物。

发明内容

本发明提供一种植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8及其在烟草黑胫病防治中的应用，用以提供一种运用于烟草黑胫病防治的微生物源菌剂研发的菌株，避免或减少由不合理使用化学农药所导致的抗药性、环境污染和人类健康威胁问题。

本发明公开的植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：武汉市武汉大学，430072，保藏日期2018年08月27日，保藏编号CCTCC NO:M 2018569。

如上所述的植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8，其中，植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8菌株的培养方法包括：

从烤烟土壤中获得植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8菌株；

将菌株接种到R₂A培养基斜面上，于30℃的温度条件下培养7天后获得斜面种子；

将斜面种子接种到三角瓶中的R₂A液体培养基中，于30℃的温度和180rpm的摇床转动频率条件下培养5天后获得液体种子；

将液体种子按3％的体积比例接入发酵罐中的R₂A液体培养基中，发酵时间96小时后获得植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8菌株发酵液；在1000升发酵罐中的培养条件控制在：温度30℃，搅拌速度150rpm。

本发明公开的植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8在烟草黑胫病防治中的应用，优选地，在烟草苗长至5-6片叶子时，利用植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8粉剂沾烟草苗根，用量为5克/株；

植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8粉剂的制备方法为：

将植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8菌株发酵液在10000rpm条件下离心10min，去除上清液后获得植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8菌体；

将植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8菌体与硅藻土按质量比为1:4的比例混合均匀，然后在65℃以下烘干或晾干至水分含量小于5％，研磨后获得植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8粉剂，植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8粉剂中植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8菌株的活菌数含量在8.5×10⁹个/克以上。

本发明提供的植烟土壤鞘氨醇单胞菌X1-8及其在烟草黑胫病防治中的应用具有以下优点：