[发明专利]一种把根皮苷转化为根皮素的方法在审
申请号: | 201811201681.2 | 申请日: | 2018-10-16 |
公开(公告)号: | CN109355317A | 公开(公告)日: | 2019-02-19 |
发明(设计)人: | 杨文国;杨美英;谢永富;赵军 | 申请(专利权)人: | 桂林莱茵生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12P7/26 | 分类号: | C12P7/26 |
代理公司: | 南宁曙华知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 45121 | 代理人: | 李林生 |
地址: | 541199 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 根皮苷 根皮素 酶解 混合酶 纤维素复合酶 果胶复合酶 脱色 固液分离 酸解工艺 原料溶解 传统的 单一酶 省略 乙醇 灭活 转化 | ||
本发明提供一种把根皮苷转化为根皮素的方法,包括如下步骤:将含根皮苷的原料溶解于乙醇或水溶液中,加入纤维素复合酶与果胶复合酶的混合酶,酶解温度为45~55℃,酶解时间10~96小时,酶解结束后灭活,固液分离,得到根皮素产品。本发明通过混合酶的使用,解决单一酶酶解不完全的问题,提高根皮苷转化率,实现了根皮苷转化率提高至95%以上;本发明得到的根皮素为白色,省略了传统的工艺如酸解工艺需脱色的步骤,进一步降低生产成本。
技术领域
本发明涉及生物技术领域,特别是一种把根皮苷转化为根皮素的方法。
背景技术
根皮素(phloretin),又名三羟苯酚丙酮,CAS号60~82~2,属于二氢查尔酮化合物。根皮素在天然植物中的含量稀少、提取率低下,限制了根皮素的发展和应用,因此,对根皮素进行合成与纯化的相关研究满足科研和市场需求,具有重要意义。
目前,根皮素的工业化生产主要采用酸碱水解或酶解的方法转化根皮苷为根皮素,如:中国专利CN103351291B公开了一种天然根皮苷半合成制备根皮素工艺;该发明将根皮苷粗品置于不锈钢反应釜,溶解于5%的强碱性溶液简单精制过滤得到根皮苷盐溶液,转入带夹套搪瓷反应釜,并在低温下加入路易斯酸和金属催化剂,约35℃反应10~15h。再降温至0℃析晶,抽虑、去离子水洗涤得到根皮素粗晶。该技术由于反应条件剧烈,产生更多杂质多造成纯化困难,同时容易改变物质结构等转化率低等;另外采用该工艺所得产品颜色为略带粉红色或棕红色,产品水溶液分散效果不好。同时,采用强酸强碱带来严重环境污染,高含量根皮苷水溶性不好,要想从高含量根皮苷获得根皮素是较为困难。
又如:中国专利CN101701226A公开了一种酶解法生产根皮素的方法,其包括如下步骤:将根皮苷质量含量为10%~80%的根皮苷原料溶于去离子水中;加入活化的sino-β水解酶,所述根皮苷原料与所述sino-β水解酶的质量比为1~50∶1,在20℃~90℃,在搅拌下,酶解反应5~72小时;迅速升温到60℃~100℃灭活15~35分钟;固液分离,固体经干燥,得根皮素。
目前现有的技术的应用有一定的限制,如采用酸碱水解法,虽然具有成本低的优势,但存在强酸强碱残留、环境污染、转化专一性差和产品需脱色等不足;采用酶解法则需要商品水解酶,且酶不能回收重复利用,导致工艺成本过高,同时该水解酶作为原料,成本较高,不易于工业化大生产。本发明可以克服酸碱水解和单一酶水解法的不足,具有反应条件温和、专一性强、生产成本低和环境友好的优点。
发明内容
为克服现有的克服酸碱水解和纯酶水解法的不足,本发明提供了一种把根皮苷转化为根皮素的方法,所述方法包括如下步骤:
一种把根皮苷转化为根皮素的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
步骤一:溶解,将含根皮苷的原料溶解于乙醇或水中;
步骤二:酶解,在步骤1溶液中加入纤维素复合酶与果胶复合酶的混合酶,所述混合酶与根皮苷原料的质量比为1:10~40,酶解温度为45~55℃,酶解时间10~96小时;
步骤三:灭活,酶解结束后将反应液加热到75~100℃,10~45分钟;
步骤四:固液分离,得固体物质为根皮素;
优选的,步骤一所述乙醇,为酸性乙醇,pH值为3.5~5.5;
优选的,所述酸性乙醇,制备方法为使用盐酸调配而成;
优选的,所述步骤一中所述乙醇体积百分比浓度为0~5%;
优选的,步骤一所述将含根皮苷的原料溶解于乙醇中,其含根皮苷的原料与乙醇质量比为1:10~40;
优选的,步骤一所述含根皮苷的原料,其根皮苷质量含量为80%~99%;
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