[发明专利]用于检测COX-2基因多态性的试剂盒

说明书

本发明公开了用于检测COX‑2基因多态性的试剂盒，试剂盒包括盒体、盒盖、海绵衬垫、冷冻盒架、冰冻盒，盒盖与盒体通过铰接相连，盒体内设有第一凹槽，冷冻盒架竖直设置于第一凹槽的中间位置，海绵衬垫位于盒体内，本发明试剂盒适用于临床多种样本类型检测，具有特异性强，灵敏度高，实验周期短，成本低等优点；不仅解决了试剂盒在运输过程中的棘手问题，并且在试验过程中，能够快速取用，操作简便；试剂盒盒体采用3层结构，内层为PS材质，安全无毒、耐高温、易清洗，保温层为PU材质，具有低温热传导功能，能长时间保持温湿度平衡，且防震抗压、防水防潮，外层为PE材质，化学稳定性强，安全环保，耐磨性好。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，具体涉及用于检测COX-2基因多态性的试剂盒。

背景技术

环氧酶是合成各种前列腺素(PGs)的关键酶，细胞膜中的磷脂在磷脂酶A2催化下释放出花生四烯酸，后者在环氧酶的催化下形成PGH2，PGH2又分别在相应前列腺素异构酶作用下合成PGE、PGF、PGD、PGI等，COX有两种同工酶COX-1和COX-2，人体COX-2基因定位于染色体的1q25.2～q25.3区，长度约8.3kb，包含10个外显子和9个内含子，共编码604个氨基酸。COX-2为诱导型酶，生理情况下，在大多数组织和细胞中检测不到，离体情况下，许多刺激物，如生长因子、炎性细胞因子肿瘤诱导剂等可刺激细胞的COX-2表达，COX-2在动脉粥样斑块中表达，阿司匹林剂量需要达到抑制COX-1剂量的170倍，才能阻断COX-2，小剂量阿司匹林不能完全抑制COX-2诱导的TXA2生成，也是阿司匹林抵抗的原因之一，COX-2基因启动子G-765C多态位点研究表明GC杂合基因携带者与GG纯合基因携带者相比较，前者对阿司匹林药效不敏感的概率是后者的3.872倍。

因此，COX-2基因多态性改变可能潜在地影响某种因子的结合，改变基因的转录活性，进而影响环氧化酶的表达，通过对COX-2基因多态性的检测可为个体对某些疾病的易感性诊断提供帮助。

发明内容

本发明的目的在于提供用于检测COX-2基因多态性的试剂盒，解决了目前市场上针对COX-2基因多态性检测成本高、耗时、特异性不强且操作复杂的问题，试剂盒体积小，操作简单，便于运输携带和使用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：用于检测COX-2基因多态性的试剂盒，试剂盒包括盒体、盒盖、海绵衬垫、冷冻盒架、冰冻盒，盒盖与盒体通过铰接相连，盒盖与盒体通过扣件盖合，盒体内设有第一凹槽，冷冻盒架竖直设置于第一凹槽的中间位置，海绵衬垫位于盒体内，海绵衬垫上设有多个试剂管孔并装有多个装有检测试剂的试剂管，试剂管包括装有野生型阳性对照的试剂管、装有突变型阳性对照的试剂管、装有阴性对照的试剂管、装有G-765C位点基因多态性检测反应液的试剂管；试剂管孔在所述海绵衬垫上环形排列，上述的装有野生型阳性对照、突变型阳性对照、阴性对照、G-765C位点基因多态性检测反应液的试剂管均为2ml试剂管。

上述用于检测COX-2基因多态性的试剂盒，其中，所述G-765C位点基因多态性检测反应液主要包含：包括TaqDNA聚合酶、dUTPs、尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG酶)、特异性引物、探针、MgCL₂。

上述用于检测COX-2基因多态性的试剂盒，其中，所述野生型阳性对照为含有G-765C位点的野生型纯合子基因序列及其多态性检测上游和下游引物及引物之间的线粒体DNA序列的质粒，突变型阳性对照为分别含有G-765C位点的突变型纯合子基因及其多态性检测上游和下游引物及引物之间的线粒体DNA序列的质粒。