[发明专利]生物分子分析试剂盒及生物分子分析方法

说明书

本发明的生物分子分析试剂盒如下构成，其具有用于进行酶反应的反应容器，所述反应容器包含具有容器形状部的基体部和设置在所述容器形状部的至少内表面的低吸附结构部，所述低吸附结构部与所述酶反应中的作为分析对象的试样和用于所述酶反应的试剂中的至少一个的吸附率比所述基体部的吸附率低；在所述反应容器内进行酶反应时，对由所述酶反应产生的信号进行检测。

本申请是申请日为2015年2月2日、优先权日为2014年1月31日、中国专利申请号为201580006310.7、发明名称为“生物分子分析试剂盒及生物分子分析方法”的分案申请。

技术领域

本发明涉及生物分子分析试剂盒及生物分子分析方法。

本申请基于2014年1月31日于日本申请的日本特愿2014-017942号主张优先权，其内容援引于此。

背景技术

已知通过对生物分子进行分析来进行疾病或健康状态诊断(体质诊断)。例如，有利用单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism：SNP)分析进行的健康状态诊断、利用体细胞突变分析进行的抗癌药给药判断、利用病毒的蛋白或DNA的分析进行的感染病对策等。

近来，通过世界性人类基因组分析已经弄清楚了约31亿个碱基对的序列，弄清楚了人的基因数约为3～4万个。人类在个体间存在碱基序列的差异，将特定群体人口的以1％以上的频率存在的碱基序列的差异称作基因多型。其中启示，SNP与多种疾病具有关联性。

例如，关于人的遗传疾病认为，一个基因中的SNP是导致生病的原因。另外认为，多个基因中的SNP对生活习惯病或者癌症等也有影响。因此认为，SNP的分析在药物靶点的探索或副作用的预见等药品开发中是极为有效的。因而，SNP的分析作为世界性的巨大项目正在推进。

作为药物效果或副作用程度方面存在个体差异的原因之一，可举出与每个人的药物代谢有关的酶群的差异。最近逐渐弄清楚了，该差异是由SNP等基因上的微小差异所导致的。

近年来考虑通过预先对患者的基因进行分析以选择最适合的药剂来向患者给药的方法。此外，不仅限于单基因遗传病、对于多因子疾病而言，基因诊断的意义也急速增加。另外，以病原菌或病毒为靶的药物的效果有时是同种，有时每个个体不同，这多是由每个个体的基因的微细差异所导致的。可以预料，今后这样的作为外来因子的病原菌或病毒的基因诊断作为检查对象也会确实地增加。

如此，在后基因组时代的医疗中，重要的是能够对人或病原微生物的基因的微小差异、特别是SNP进行分析，可以预料今后其重要性也会增加。

一直以来研究了各种对碱基序列的微小差异、特别是SNP进行分析的方法(参照非专利文献1～2)。为了进行实用水平上的分析，要求在低成本、方法的简便性、信号检测时间的长短、检测结果的正确性等方面均优异。但是，到目前为止还未知有满足上述所有要求的方法。

对SNP进行分析时，一般情况是目标基因片段在试样中仅微量地含有。此时，需要通过任何方法预先对目标基因进行扩增。PCR(Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应)法作为迅速且重现性高的基因扩增法一直以来被大家所熟知。

一般来说，为了检测目标基因一个碱基的差异，需要以下两阶段的工序：使用了PCR法等的基因扩增阶段；和研究所扩增的基因的一个碱基的差异的阶段(参照非专利文献3)。但是，需要两阶段工序的方法由于工序多，因此处理变得繁杂。此外，PCR法由于需要进行温度升降，因此需要在装置大型化、耐热性的反应容器和反应液不蒸发方面下功夫。

作为不需要二阶段反应的SNP检测方法，有侵入物法。侵入物法不需要PCR的扩增，由于可以等温地促进反应，因此装置可以小型化。但是，在侵入物法中，由于不包括基因的扩增工序，因此信号扩增慢、为了进行检测判定需要数小时的反应时间。侵入物法是使用了酶反应的检测方法。其中，在使用了酶的信号扩增中，作为缩短信号浓度达到饱和的时间的方法，考虑在微小空间内使其反应的方法。