[发明专利]诊断冠心病的外周血单个核细胞环状RNAs及相关应用

说明书

本发明提供了诊断冠心病的外周血单个核细胞环状RNAs及相关应用；具体而言，本发明提供了检测来自待测个体的样品中circRNA水平的试剂材料和/或仪器设备在制备用于诊断冠心病患病风险的检测系统中的应用，所述circRNA包括：Hsa_circ_0001879和/或Hsa_circ_0004104。Hsa_circ_0001879和/或Hsa_circ_0004104的表达水平升高，待测个体冠心病患病风险升高。

技术领域

本发明是关于诊断冠心病的外周血单个核细胞环状RNAs及相关应用，具体而言，本发明是关于检测来自待测个体的样品中Hsa_circ_0001879和/或Hsa_circ_0004104的水平的试剂材料和/或仪器设备在制备用于评估冠心病患病风险的检测系统中的应用，还涉及一种评估冠心病发病风险的检测系统。

背景技术

冠心病(coronary artery disease，CAD)是目前最常见的心血管疾病。据统计，全球每年超过一千万人死于心血管疾病，其中多半归因于急性心肌梗死。近年来，我国CAD发病率呈上升趋势并趋于年轻化。目前CAD的影像学诊断、介入手术及药物治疗等诊断治疗方面水平有所提高，但CAD的发病率及死亡率仍居高不下。造成这种差异的原因之一是多数患者就诊时已失去最佳治疗时机，目前缺乏早期识别CAD的高度敏感及便捷的诊断方法。因此，探究CAD早期诊断的方法是提高CAD治愈率、降低死亡率的重要手段。

CAD的发生发展是由环境因素和遗传因素共同决定，而其生物标志物应表现为患者冠状动脉发生粥样硬化性损伤并在早期和发生发展过程中浓度显著升高或降低，有效预测心血管疾病风险程度及斑块不稳定的有潜力的指标。传统循环中有关标志物出现在炎症、内皮损伤、凝血等过程中，包括非特异性炎症标志物CRP、炎症因子类(白介素)、黏附分子类、金属基质酶类等等。随着检测技术和发病机制研究的深入，应深入探索CAD生物标志物以阐明CAD发生发展机制，为CAD预测、预后及靶向治疗提供有利基础。

人类基因组计划完成后，人们发现超过90％不编码的蛋白质序列，而针对非编码RNA的研究逐渐成为探索疾病发生发展的关键。环状RNA(circular RNA，circRNA)是继微小RNA(microRNA，miRNA)和长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)之后一种新的非编码RNA研究热点。circRNA是一类由外显子、内含子或两者的转录本形成的封闭环，既没有5’端帽子，也没有3’端的多聚A尾。由于其特殊的环状结构，使其具有高度的序列保守型、结构稳定性、丰度高并且有一定的组织特异性和疾病特异性，这也使circRNA作为疾病的生物标志物成为可能。circRNA在疾病的发生发展过程中，不仅可以作为竞争内源性RNA(competitive endogenous RNA，ceRNA)来影响基因表达水平，还可以利用其miRNA应答元件靶向结合miRNA，以阻断miRNA对其靶基因的调控作用，从而发挥基因的调控作用。

随着芯片及高通量测序技术的发展，许多研究筛选出了多种肿瘤疾病、免疫疾病及血液疾病中差异表达的circRNA，并为后续深入研究circRNA在疾病发生发展中的功能提供理论基础。这些研究主要集中在肝癌、结肠癌、宫颈癌、脑胶质瘤等肿瘤疾病，用于诊断CAD的circRNA诊断标志物证据不足。

发明内容

本发明的一个目的在于寻找新的诊断冠心病的生物标志物，为CAD发生发展机制研究、CAD预测、预后及靶向治疗等研究提供有利基础。

本案发明人在研究中发现，与对照相比，冠心病患者的外周血单个核细胞(PBMCs)中Hsa_circ_0001879和Hsa_circ_0004104表达水平显著上调，ROC曲线下面积AUC分别为0.70和0.70，两者结合诊断冠心病时，AUC可以升高到0.74。因此Hsa_circ_1879、Hsa_circ_0004104及其两者的联合可用于冠心病的早期诊断，为CAD致病机理、调控通路研究提供新思路和新角度。

从而，一方面，本发明提供了以下circRNA作为诊断冠心病的生物标志物的应用：