[发明专利]一株高产乳糖酶的米曲霉及其发酵产酶方法有效
申请号: | 201811183119.1 | 申请日: | 2018-10-11 |
公开(公告)号: | CN109321469B | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 张杰;王兴吉;曹世源;郭庆文;钱娟娟;王克芬 | 申请(专利权)人: | 山东隆科特酶制剂有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/24;C12R1/69 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 栗华楠 |
地址: | 276400 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高产 乳糖酶 曲霉 及其 发酵 方法 | ||
1.一株高产乳糖酶的米曲霉,其特征在于:所述菌株为米曲霉(
2.如权利要求1所述一株高产乳糖酶的米曲霉,其特征在于:所述米曲霉菌CA-08发酵所产的乳糖酶最适作用pH范围为4.0-7.0,最适作用温度为80℃。
3.如权利要求1所述一株高产乳糖酶的米曲霉,其特征在于,采用所述菌株发酵产酶方法如下:
发酵罐培养:将种子液按照接种量6-8%体积比接入发酵罐培养基,恒温30-32℃,转速200-220 r/min,设置通风量:1-2 vvm,发酵全程利用补料培养基控制发酵液pH值为5.5-5.8,发酵至酶活增长缓慢,菌体自溶严重时结束发酵,发酵周期为105 h。
4.如权利要求3所述的高产乳糖酶的米曲霉,其特征在于:
所述发酵罐培养基为:麦芽糖80-120 g/L,豆饼粉25-40 g/L,玉米浆25-30 g/L,硫酸镁1.8-2.2 g/L,硫酸铵4-5.5 g/L,磷酸二氢钾4-6 g/L,氯化钙0.5-1.2 g/L,pH 5.5-5.8,121℃灭菌30 min;
所述补料培养基为:麦芽糖150-300 g/L,玉米浆20-30 g/L,硫酸镁1.8-2.5 g/L,121℃灭菌30 min。
5.如权利要求3所述的高产乳糖酶的米曲霉,其特征在于:所述乳糖酶的提取与精制方法如下:
先将最终发酵液加入1~5%珍珠岩助滤剂,压滤得到澄清压滤酶液;
用20000分子量超滤膜对所述澄清压滤酶液进行超滤浓缩,得到浓缩液;
在所述浓缩液中加入20%稳定剂、0.45%防腐剂,调节 pH5.5,然后进行过滤除菌,即得到乳糖酶成品液体酶制剂。
6.如权利要求5所述的高产乳糖酶的米曲霉,其特征在于:所述稳定剂为甘油,所述防腐剂为质量比为1:2的山梨酸钾和苯甲酸钠。
7.权利要求1所述米曲霉在制备乳糖酶中的应用。
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