[发明专利]一种抗人心肌肌钙蛋白I的抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种包含cTnI抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。所述结合蛋白活性强，与人cTnI蛋白具有很高的亲和力，可广泛应用于cTnI蛋白的检测领域。

技术领域

本发明涉及生物技术和医学技术领域，尤其是涉及一种抗人心肌肌钙蛋白I的抗体及其应用。

背景技术

20世纪80年代前，世界卫生组织(WHO)一直将心肌酶谱活性作为急性心肌梗死(AMI)的诊断标准之一。20世纪80年代末，科研人员发现，肌钙蛋白(troponin，Tn)的敏感性和特异性高于磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶和天冬氨酸氨基转移酶等生物标志物。心肌肌钙蛋白(cTnI)仅存于心肌，是心肌细胞的标志物，其异常改变可影响心脏的舒缩功能，并可用于诊断心肌坏死，判断心肌损伤等，成为心肌细胞损伤敏感性和特异性最强的标志物之一，是公认的快速诊断AMI和急性冠脉综合征(acutecoronary syndromes，ACS)以及协助ACS危险分层和反映其预后的主要生化标志。

正常人血液中cTnI含量一般低于0.3μg/L。当心肌细胞胞膜完整性因缺血或缺氧等受到破坏时，游离的cTnI可迅速透过细胞膜进入血流。因此，在发病初期快速、灵敏且准确的测定人血中的cTnI及其变化趋势对急性心肌梗死的诊断、急性冠状动脉综合征的危险分层、监测各种因素导致的心肌损伤等有着重要的临床意义。临床上用于检测cTnI水平的方法有酶联免疫吸附法(ELISA)，化学发光，胶体金等，不同方法都有各自的优缺点，但是都需要针对于cTnI的特异性单克隆抗体。

现有的cTnI抗体由于活性低、亲和力差，无法很好地应用于cTnI蛋白的检测中，因此本领域对于有效且特异性结合检测cTnI并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明涉及一种新颖的包含cTnI抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。

所述抗原结合结构域包括选自下述氨基酸序列的至少一个互补决定区，或与下述氨基酸序列的互补决定区具有至少80％的序列同一性且与cTnI具有K_D≤9.45×10^-8mol/L的亲和力；

互补决定区CDR-VH1为S-X1-Y-T-F-X2-S-Y-W-M-X3，其中，

X1是G或D，X2是S或T，X3是N或Q；

互补决定区CDR-VH2为M-X1-D-P-S-D-S-X2-T-H-Y-N-Q-X3-F-K-D，其中，

X1是I或L，X2是E、Y或D，X3是F、M或L；

互补决定区CDR-VH3为A-F-X1-T-S-X2-G-D-Y，其中，

X1是L或I，X2是I、V或L；

互补决定区CDR-VL1为Q-S-I-X1-H-S-X2-G-N-X3-Y，其中，

X1是I、L或V，X2是Q或N，X3是T或S；

互补决定区CDR-VL2为L-X1-Y-K-V-S-X2-R-L-S，其中，

X1是I或L，X2是Q、N或K；

互补决定区CDR-VL3为F-X1-G-S-H-X2-P-X3-T，其中，

X1是Q或N，X2是I、L或V，X3是I或L。

一个重要优点在于，所述结合蛋白活性强，与人cTnI具有很高的亲和力。

附图说明