[发明专利]一种抗CA50的抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种新颖的包含CA50抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。所述结合蛋白活性强，与人CA50具有很高的亲和力，可广泛应用于CA50的检测领域。

技术领域

本发明涉及生物技术和医学技术领域，尤其是涉及一种抗CA50的抗体及其应用。

背景技术

CA50是一种非特异性的广谱肿瘤标志物(Tumor Marker)。是一种唾液酸酯和唾液酸糖蛋白，是反映肿瘤存在的化学类物质。它们或不存在于正常成人组织而仅见于胚胎组织，或在肿瘤组织中的含量大大超过在正常组织里的含量，它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质，借以了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能，以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及治疗指导。

CA50是一种唾液酸酯和唾液酸糖蛋白，正常组织中一般不存在,但CA50广泛分布于结肠、直肠、肺、胰、胆囊、子宫和肝等多种肿瘤组织中。癌症时因癌细胞糖酵解不完全和酸性产物堆积，使CA50产生过多，释放于血液中。消化道肿瘤时血清CA50浓度升高最多见，尤其以胰腺癌和胆囊癌阳性率最高，在80％以上，结肠癌和直肠癌为60％～70％，肝癌时也为60％～70％，肺癌为60％，对肺癌的鉴别诊断优CEA，在溃疡性肠炎、肺炎、胃炎时CEA均可升高，而CA50无此现象。卵巢癌、肺癌、子宫颈癌、乳腺癌患者血清CA50浓度也可升高。癌症患者血清CA50值与病程进展相关，CA50值越高，预后越差。恶性胸、腹腔积液中CA50阳性率很高，良性胸腔积液中极少阳性，提示用胸、腹腔积液进行鉴别诊断比血清更有意义。慢性胰腺炎、结肠炎、胆囊炎和肺炎时也有CA50量升高，但随着炎症消除而下降。肝硬化时CA50阳性率达50％，肝炎25％，未透析的肾功能不全患者约37％阳性，应引起临床注意。CA50与CA19-9相关性极高，因此CA50检测对消化道肿瘤诊断价值与CA19-9相似，但部分Lewisab的结肠癌、胰腺癌患者CA19-9检测阴性时，CA50可为阳性。

CA50(CA50)是一种非特异性的广谱肿瘤标志物，与癌抗原19-9有一定的交叉抗原性，主要用于胰腺癌、结肠/直肠癌、胃癌的辅助诊断，其中胰腺癌病人增高最明显。

CA50目前常用免疫检测法检测，都需要用到针对CA50的单克隆抗体，而目前国内用于检测CA50的单克隆抗体原料极少，且灵敏度、特异性上都存在缺陷，还有较大的改善空间。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明涉及一种新颖的包含CA50抗原结合结构域的分离的结合蛋白，灵敏度和特异性相较之现有的CA50的单克隆抗体都有明显优势，本发明还对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。

所述抗原结合结构域包括选自下述氨基酸序列的至少一个互补决定区，或与下述氨基酸序列的互补决定区具有至少80％的序列同一性且与CA50具有K_D≤8.75×10^-8mol/L的亲和力；

互补决定区CDR-VH1为G-X1-T-F-X2-D-A-X3-M-D，其中，

X1是I、V或L，X2是S或T，X3是F或M；

互补决定区CDR-VH2为I-G-X1-N-G-N-X2-H-A-T-Y-X3-A-E-S-V，其中，

X1是Q或N，X2是D、E或N，X3是Y、F或W；

互补决定区CDR-VH3为T-X1-R-F-X2-Y，其中，

X1是I、L或V，X2是P或A；

互补决定区CDR-VL1为Q-X1-X2-N-S-Y-X3-S，其中，

X1是E或D，X2是L或I，X3是I或L；

互补决定区CDR-VL2为R-X1-K-X2-L-X3-D，其中，