[发明专利]一种肝癌靶向阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束

说明书

本发明为一种肝癌靶向阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束，利用肝癌特异性抗体HAb18 F(ab’)₂介导阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束进行导向治疗。采用化学方法共价偶联阿霉素(DOX)和乳酸‑羟乙酸共聚物(PLGA‑PEG)的合成DOX‑PLGA‑PEG，利用透析法制备DOX‑PLGA‑PEG纳米胶束。通过HAb18 F(ab’)₂抗体物理吸附来修饰DOX‑PLGA‑PEG纳米胶束，制备靶向胶束。靶向胶束表征满意，可以被肿瘤细胞吞噬摄取，有生物活性的药物从胶束中释放。载药纳米胶束的抗肝癌效果较药物单体明显，靶向胶束依靠被动和主动靶向双重作用大量累积在肿瘤局部，所以疗效最显著。本发明获得高效低毒、靶向杀伤肝癌细胞的新型递药系统，改善肝癌治疗效果，开发疗效肯定的抗肿瘤新型纳米药物，具有广阔的应用前景。

【技术领域】

本发明属于生物制药和药物剂型改进，为一种肝癌靶向阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束。

【背景技术】

肝癌是常见恶性肿瘤，外科手术为治疗首选，包括部分肝切除和肝移植，术后可获得较长期生存，然而不可切除的肝癌仍有赖于药物治疗等，由于肿瘤属于全身性疾病，转移复发机率高，故其更具有重要意义。因此，开发更为有效的肝癌新治疗策略是一项重要而迫切的任务。

药物偶联嵌段共聚物纳米胶束正成为药剂学领域的一个研究热点，这种胶束能够将大剂量的抗肿瘤药物准确、高效地通过被动靶向作用输送指定部位并控释给药，从而降低药物对正常组织的损害，提高治疗效果。纳米胶束可以进一步修饰，结合抗体等配基，进而达到主动靶向目的。

利用肝癌特异性抗体HAb18F(ab’)₂介导阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束进行导向治疗，获得高效低毒、靶向杀伤肝癌细胞的新型递药系统，改善肝癌治疗效果，开发疗效肯定的抗肿瘤新型纳米药物，具有广阔的应用前景。

【发明内容】

针对肝癌药物治疗效果的局限，本发明所述一种肝癌靶向阿霉素偶联嵌段共聚物纳米胶束，能够显著提高对肝癌的疗效。阿霉素已应用于临床，将阿霉素装载于纳米胶束治疗肝癌在理论有基础，在临床应用上有前景。采用化学方法共价偶联阿霉素(DOX)和乳酸-羟乙酸共聚物(PLGA-PEG)的合成DOX-PLGA-PEG，利用透析法制备DOX-PLGA-PEG纳米胶束。通过HAb18F(ab’)₂抗体物理吸附来修饰DOX-PLGA-PEG纳米胶束，制备靶向胶束。纳米载体材料PLGA-PEG在体内生物降解为无毒的水和二氧化碳，美国FDA已批准其作为药物辅料用于临床。

制备方法：

1、DOX-PLGA-PEG合成：PLGA–PEG二嵌段共聚物3g溶解于冰冷(0℃)的二氯甲烷30ml中，然后逐滴加入对硝基苯基氯甲酸酯80mg和吡啶63mg，在室温并通以氮气保护的条件下反应3h以活化PLGA的末端羟基。活化的PLGA–PEG二嵌段共聚物在冰冷乙醚沉淀后收集，沉淀过滤并低压干燥。在室温、氮气保护的条件下，取活化的PLGA–PEG二嵌段共聚物0.25g溶解于二甲基甲酰胺7.5ml中，加入10mg阿霉素和三乙胺6.5mg，避光、持续搅拌24h。将上述反应液加入到去离子水中，透析3次共4h以纯化合成的 DOX–PLGA–PEG。冷冻干燥后，DOX–PLGA–PEG干粉置于–20℃保存备用。

2、纳米胶束制备：DOX–PLGA–PEG干粉100mg溶解于10ml丙酮，然后加入到100ml 磷酸盐缓冲液(PBS，pH 7.4)中过夜，胶束自组装形成，透析除去丙酮和磷酸盐，通过观察透明淡红色溶液和丁达尔现象证实。冷冻干燥后，胶束干粉4℃保存备用。