[发明专利]一种增强胶体金层析试纸信号强度的增敏试剂和使用增敏试剂的增敏方法

说明书

本发明涉及胶体金层析法检测技术领域，为提高胶体金免疫层析试纸的检测的准确性，提供一种增强胶体金层析试纸信号强度的增敏试剂和使用增敏试剂的增敏方法。该增敏试剂包括混合时可在胶体金表面形成银颗粒沉淀的A试剂和B试剂，A试剂为硝酸银溶液，B试剂为对苯二酚，对苯二酚附在玻璃纤维膜或聚酯纤维膜上。在常规的层析免疫反应结束后，将增敏试剂滴加在层析试纸上，混合溶液通过毛细作用到达T线和C线常温反应20～30min即可，然后扫描读数。本发明的增敏试剂通过在胶体金颗粒表面形成镀银颗粒增强胶体金信号灵敏性，提高检测的准确性，具有较广泛的应用场合，增敏方法简洁，容易操作。

技术领域

本发明涉及胶体金层析法检测技术领域，具体涉及一种增强胶体金层析试纸信号强度的增敏试剂和使用增敏试剂的增敏方法。

背景技术

胶体金层析试纸是在免疫渗透技术的基础上建立的一种快捷简单的免疫学检测技术，采用胶体金免疫层析技术研制而成。其中胶体金是氯金酸HAuCl₄的水溶胶，氯金酸在还原剂如柠檬酸盐、鞣酸-柠檬酸盐等作用下聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态。胶体金颗粒具有双层电结构，中心为许多金原子组成的带正电的胶金核，其外为带负电的AuO^2-及部分反粒子所形成的吸附层。胶体金在碱性条件下带负电荷，蛋白质分子带正电荷，二者极易静电结合形成大的聚合物，由于这种结合是静电结合不影响蛋白质的生物特性，可做示踪标记物应用于生物行业各领域中，进行定性或半定量快速免疫检测。

胶体金层析试纸包括PVC板，样品口(样品垫)、胶体金垫、NC膜、吸水滤纸，其中NC膜上设置测试线T线、质控线C线，通过T线和C线颜色变化确定检测结果。因此当T线或C线颜色变化不明显时将影响胶体金层析试纸的检测准确性和精度，所以提高胶体金免疫层析试纸的检测灵敏性具有重要意义。

中国专利CN201210359920.3，专利名称一种快速检测铜离子的胶体金增敏层析试纸，公开了一种由样品垫、金标结合垫、增敏垫、包被膜和吸水垫组成的增敏层析试纸，其中金标结合垫为吸附小金标记铜离子抗体的玻璃纤维棉，增敏垫为吸附大金标记羊抗鼠IgG的玻璃纤维棉，在包被膜上依次有用铜离子偶联载体蛋白的溶液印制的直线式隐形检测线T线，同时用羊抗鼠IgG溶液印制的直线式隐形控制线C线。但是该胶体金增敏层析试纸仅适用于铜离子检测的增敏性，对其他物质的检测不具有适用性。

发明内容

为提高胶体金免疫层析试纸的检测的准确性，本发明的目的在于提供一种增强胶体金层析试纸信号强度的增敏试剂，能够明显增强胶体金层析试纸信号强度，而且具有较广泛的应用场合，同时方便操作和使用。

本发明的另一目的在于提供使用增敏试剂增强胶体金免疫层析试纸检测灵敏性的增敏方法。

本发明提供如下的技术方案：

一种增强胶体金层析试纸信号强度的增敏试剂，所述增敏试剂包括混合时可在胶体金表面形成银颗粒沉淀的A试剂和B试剂，其中A试剂中含有银离子，B试剂为将银离子转化为银颗粒的还原试剂。

作为本发明的优选，A试剂为硝酸银溶液，B试剂为对苯二酚。

作为本发明的优选，对苯二酚附在玻璃纤维膜或聚酯纤维膜上。

本发明的增敏试剂中A试剂在B试剂的作用下转化为银颗粒沉淀在胶体金颗粒表面，使胶体金颗粒变成体积增大的镀银颗粒，形成相对胶体金标记物的二级信号反应，通过增加胶体金颗粒的体积增强胶体金颗粒的信号灵敏性。其中所用A试剂为硝酸银溶液，所用B试剂为对苯二酚，两者的反应过程如下：