[发明专利]一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法在审
| 申请号: | 201811174060.X | 申请日: | 2018-10-09 |
| 公开(公告)号: | CN109164184A | 公开(公告)日: | 2019-01-08 |
| 发明(设计)人: | 李成忠;孙燕 | 申请(专利权)人: | 江苏农牧科技职业学院 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
| 代理公司: | 北京汇知杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11587 | 代理人: | 杨巍;蔡伦 |
| 地址: | 225300*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 化学活性 回流提取 采收期 芍药 制备 取材 制备标准曲线 芍药内酯苷 苯甲酸 成分分离 对比分析 没食子酸 色谱分析 随机抽取 样品粉末 乙醇浸泡 丹皮酚 儿茶素 混合液 芍药苷 过筛 样本 分类 | ||
1.一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法,其特征在于:其比较方法包括以下步骤
步骤A:取材,选取不同采收时期和不同部位的芍药植株;
步骤B:分类,将不同部位的芍药植株按部位进行分类放置;
步骤C:制备供品溶液,将所选取的芍药植株通过干燥粉碎、过筛、回流提取、过滤、浓缩、定容和过膜取续滤液等操作进行制备;
其中,所述干燥粉碎先将样品置于烘箱中于105℃杀青10min,并在70℃下烘干至恒重,然后使用400Y型粉碎机将干燥后的样品进行粉碎,所述过筛使用80目筛将粉碎后的样品进行筛选,所述回流提将粉碎后的样品加入到浓度为75%的乙醇溶液中得到混合液,采用回流加热装置进行加热回流,得到回流液,所述过滤使用定向滤纸进行操作,所述浓缩将滤液通过RE-52A型旋转蒸发仪减压旋转蒸发至膏状,所述定容使用甲醇溶液定容至10ml,所述过膜取续滤液选用0.45um的滤膜;
步骤D:色谱分析,将续滤液倒入色谱分析的样品小瓶,放入Agilent1200型高效液相色谱仪内,获得色谱图;
步骤E:制备标准曲线,取制备好的对照品溶液配置不同浓度,分别进样10ul,记录色谱图,由峰面积对相应的浓度直线回归,得芍药苷回归方程;
其中,所述称取标准对照品精密称取一定重量的芍药苷、芍药内酯苷、儿茶素、没食子酸、苯甲酸和丹皮酚对照品,所述制备对照品溶液将称取的对照品加入甲醇置于量瓶内,制成混合溶液,所述稀释分别稀释成2、4、8、32、64和128倍,所述测定峰值面积在色谱条件下分别对各对照品进样测定,所述制线性方程利用SPSS统计软件计算各对照品浓度与色谱峰面积的线性回归方程和r值;
步骤F:对比分析,将色谱分析所获得的数值进行记录,再根据线性方程,分别计算出不同部位和不同采收期芍药苷、芍药内酯苷、儿茶素、没食子酸、苯甲酸和丹皮酚的含量。
2.根据权利要求1所述的一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法,其特征在于:所述步骤A中,分别在不同地点进行取材,且选取的材料进行随机抽取。
3.根据权利要求1所述的一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法,其特征在于:所述步骤C中,制备供品溶液的回流提取过程在90℃条件下回流提取2次,且每次回流2小时。
4.根据权利要求1所述的一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法,其特征在于:所述步骤C中,制备供品溶液将过筛的样品粉末用50%的乙醇浸泡30min。
5.根据权利要求1所述的一种芍药不同部位和不同采收期化学活性成分的比较方法,其特征在于:所述步骤D中,色谱分析条件为色谱柱:DiamonsilCis柱;流动相:流动相A为乙腈,流动相B为0.025%磷酸水溶液;梯度洗脱条件:0~18min,A:5%`12%;18`22min,A:12%`15%;22`32min,A:15%;32~45min,A:15%`20%;45~55min,A:20%;55`75min,A:20%-+40%;75~80min,A:40%;检测波长:2301111e柱温:室温;进样量:5μL;理论板数按芍药苷峰计算不低于5000。
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