[发明专利]从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法

说明书

本发明公开了一种从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法，包括以下步骤：将红腺忍冬外植体灭菌后，接种于生根诱导培养基中，置于培养室中培养，即得红腺忍冬组培生根苗；所述生根诱导培养基的配制方法为：在每L的1/2MS培养基中加入6～10g的琼脂、25～35g的蔗糖、0.1～0.5mg的植物生长调节剂；并调节pH值至5.8～6.0。本发明克服了现有技术以多年生带腋芽茎段为外植体诱导的无菌瓶苗经继代转接培养后出现的长势下滑而不利于后期生根的难题。

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，具体涉及一种从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法。

背景技术

红腺忍冬(Lonicera hypoglauca Miq)为忍冬科忍冬属(Lonicera)植物，是山银花(我国名贵中药材之一)的三种来源之一，具有清热解毒、疏散风热的功效。由于红腺忍冬的药用价值、保健价值及经济价值均极高，近年来，随着社会经济发展等方面的深入、人们生活质量的提高以及需求面的扩大，红腺忍冬已经被广泛地应用于食品、饮料、保健品、化妆品及兽医用等领域；同时红腺忍冬抗逆性强，可以绿化、美化自然环境——例如防止水土流失、改善石漠化地区的自然生态环境，因此被普遍地应用于生态环境保护方面。综上多种缘由，目前社会对红腺忍冬的需求量急剧扩张，导致红腺忍冬市场已经供不应求。

在实现红腺忍冬规模化生产的社会大背景下，就如何提高红腺忍冬生产效率的研究仍十分有限，例如关于将红腺忍冬直接从外植体诱导组培生根苗以提高生产效率的研究，目前还尚未有报道。本发明能够成功将此物种外植体直接诱导成优质组培生根苗，为其在优良种质保存、快速繁育及在研究、生产中的应用拓展了新的技术参考来源。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法，克服了现有技术以多年生带腋芽茎段为外植体诱导的无菌瓶苗经继代转接培养后出现的长势下滑(如叶片细小、节间短等)而不利于后期生根的难题。

为了实现本发明的这些目的和其它优点，提供了一种从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法，包括以下步骤：将红腺忍冬外植体灭菌后，接种于生根诱导培养基中，置于培养室中培养，即得红腺忍冬组培生根苗；所述生根诱导培养基的配制方法为：在每L的1/2MS培养基中加入6～10g的琼脂、25～35g的蔗糖、0.1～0.5mg的植物生长调节剂，并调节pH值至5.8～6.0。

优选的是，所述的从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法中，所述植物生长调节剂为NAA。

优选的是，所述的从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法中，所述外植体是指从红腺忍冬植株幼苗下胚轴以上部分的枝叶上切取2.5cm～4.0cm长的顶芽，或2.5cm～4.0cm长、带2～3个节并保留节处叶片的茎段；所述红腺忍冬植株幼苗为苗龄≤4个月、具有4～6片真叶时的种子实生苗。

优选的是，所述的从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法中，所述外植体灭菌的方法为：将所述外植体先用体积分数为75％酒精浸泡25～35s，取出洗净，再于质量分数为0.1％的HgCl₂溶液中浸泡1～7min。

优选的是，所述的从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法中，所述外植体接种于生根诱导培养基中，置于培养室中培养，在培养室中的培养条件为：温度为22～28℃，相对湿度为50～75％，光照时间为12h/d，光照强度为2 000～3 000lx。

优选的是，所述的从外植体快速获得红腺忍冬组培生根苗的方法中，所述外植体接种于生根诱导培养基中的具体方法为：将外植体的旧切口斜剪切除，使新切口的切面成为一个斜面，以增加新切口的表面积，进而提高生根几率，然后以外植体芽端朝上、外植体新切口朝下的方式，将外植体新切口表面全部插入生根诱导培养基中，同时将碰触培养基的叶片部分剪除，以减少污染几率。