[发明专利]一种反硝化菌固定化颗粒及其制备方法

权利要求书

1.一种反硝化菌固定化颗粒，其特征在于重量份配比如下：

硫酸镁1份，硝酸钾5份，磷酸二氢钾2-3份，磷酸氢二钾2-3份，柠檬酸钠10-12.5份，微量元素溶液5份，海藻酸钠4-15份，铁基质生物耦合载体粉末2-10份，超纯水大于2500份。

2.一种反硝化菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于含有以下步骤：

步骤(1)、按重量份称取1份硫酸镁，5份硝酸钾，2-3份磷酸二氢钾，2-3份磷酸氢二钾，10-12.5份柠檬酸钠和5份微量元素溶液加入到2500份超纯水中溶解，得反硝化菌富集培养基；

步骤(2)、挑选几株斜面保存完整的反硝化菌，加入到经高温高压灭菌的富集培养基中，在30℃下培养24-48h，得到菌液；

步骤(3)、将步骤(2)得到的菌液放6000r/min离心10min，弃去上清液，用0.9％生理盐水洗涤后离心，再用0.9％生理盐水稀释至一定体积，混合均匀，得到反硝化菌悬液；

步骤(4)、按重量份称取4-15份海藻酸钠、2-10份铁基质生物耦合载体粉末载体，100份超纯水，并将海藻酸钠和铁基质生物耦合载体粉末载体加入到超纯水中，水浴溶解得粘稠状混合液；

步骤(5)、将步骤(4)得到的粘稠状混合液和步骤(3)得到的反硝化菌悬液按照一定比例混合后，逐滴加入含有氯化钙的溶液中，得到凝胶颗粒，然后用磁力搅拌器搅拌溶液，使得凝胶颗粒处于悬浮状态；

每100份超纯水对应使用150-200mL溶液，其中溶液中氯化钙浓度为5％；

(6)、将步骤(5)得到的含有凝胶颗粒的溶液在2-4℃条件下放置24h-48h使其交联固定，形成凝胶颗粒；

步骤(7)、将步骤(6)得到的凝胶颗粒用0.9％生理盐水洗涤2次，即得反硝化菌固定化颗粒。

3.根据权利要求2所述的一种反硝化菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于步骤(4)中所需水浴溶解时间为1-2h，水浴温度为80℃。

4.根据权利要求2所述的一种反硝化菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于步骤(5)中粘稠状混合物和反硝化菌悬液的比例为1：2-2：1。

5.根据权利要求2所述的一种反硝化菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于步骤(1)中所需溶解时间为5-10min。

6.根据权利要求2所述的一种反硝化菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于步骤(3)中的所用0.9％生理盐水洗涤次数为3-4次。

7.根据任一权利要求2、权利要求3、权利要求4、权利要求5及权利要求6所述的一种反硝化菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于所得反硝化菌固定化颗粒的直径为3-5mm。

8.根据任一权利要求2、权利要求3、权利要求4、权利要求5及权利要求6所述的一种反硝化菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于所得反硝化菌固定化颗粒的直径为4-6mm。

9.一种反硝化菌固定化颗粒，其特征在于由权利要求2、权利要求3、权利要求4、权利要求5、权利要求6、权利要求7及权利要求8所述的任一制备方法制得。