[发明专利]一种防治果树根腐病的微生物菌剂的制备方法在审
| 申请号： | 201811163231.9 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109136155A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 马文虎;李保珍;郭朝阳 | 申请（专利权）人： | 山西永丰生物工程技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C05F11/08;C12R1/01 |
| 代理公司： | 太原智慧管家知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14114 | 代理人： | 张洋 |
| 地址： | 043000 山西省*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 微生物菌剂 果树根腐病 制备 二级发酵培养 降解农药化肥 土壤生态环境 防治根腐病 光合细菌菌 重金属污染 光合细菌 果树根系 灭菌处理 三级发酵 四级发酵 修复土壤 一级发酵 培养基 根腐菌 防治 树体 病菌 菌种 发酵 肥料 残留 繁殖 改良 生长 土壤 配置 恢复 健康 | ||
1.一种防治果树根腐病的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：选取菌种：选取合格且优良的沼泽红假单胞菌和球形红细菌组成光合细菌纯菌种，其中沼泽红假单胞菌60-80份、球形红细菌10-30份；
S2：一级培养基的配置及灭菌处理：将酵母膏40-60g、硫酸铵100-300g、葡萄糖100-300g、磷酸二氢钾50-150g、磷酸氢二钾10-80g、硫酸镁1-15g、氯化钙5-20g添加到100kg的水中，调节混合水溶液的pH值为6.8-7.2，然后在100-130℃的高温条件下灭菌20-35分钟后冷却至30-40℃的条件下待用；
S3：一级发酵培养：在30-40℃的无菌条件下，选取500ml步骤S1制备的光合细菌纯菌种，将其接种至步骤S2配置的一级培养基中然后置于发酵罐内,在温度为28-30℃、1000Lx的光照条件下扩繁培养至5000ml，待培养3-5天后发酵形成一级发酵产物；
S4：二级发酵培养：在30-40℃的无菌条件下，将步骤S3发酵制备的一级发酵产物接种至二级培养基中然后置于发酵罐内,在温度为28-30℃、1000Lx的光照条件下扩繁培养至50kg，待培养3-5天后发酵形成二级发酵产物；其中，所述二级培养基的配置是按照步骤S2所述的一级培养基的10倍进行配置且二级培养基配置后采用与步骤S2相同的灭菌处理；
S5：三级发酵培养：在30-40℃的无菌条件下，将步骤S4发酵制备的二级发酵产物接种至三级培养基中然后置于发酵罐内,在温度为28-30℃、1000Lx的光照条件下扩繁培养至500kg，待培养3-5天后发酵形成三级发酵产物；其中，所述三级培养基的配置是按照步骤S2所述的一级培养基的100倍进行配置且三级培养基配置后采用与步骤S2相同的灭菌处理；
S6：四级发酵培养：在30-40℃的无菌条件下，将步骤S5发酵制备的三级发酵产物接种至四级培养基中然后置于发酵罐内,在温度为28-30℃、1000Lx的光照条件下扩繁培养至3000kg，待培养3-5天后发酵形成光合细菌菌数达到≥20亿/ml的微生物菌剂；其中，所述四级培养基的配置是按照步骤S2所述的一级培养基的600倍进行配置且四级培养基配置后采用与步骤S2相同的灭菌处理。
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