[发明专利]一种蛋氨酸寡肽及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种蛋氨酸寡肽及其制备方法和应用，该蛋氨酸寡肽的制备方法包括如下步骤：将蛋白酶溶于缓冲液并离心，得到浓度为22‑28mg/ml的蛋白酶溶液；将L‑Met‑OEt.HCl溶于缓冲液并水浴，得到浓度为0.24‑0.26M的L‑Met‑OEt.HCl溶液；将蛋白酶溶液与L‑Met‑OEt.HCl溶液按照体积比为1∶(0.8‑1.2)混合，并在48‑52℃下进行反应，随后，对反应液中蛋白酶进行灭活处理；将灭活处理后的混合液冷却、离心收集沉淀物，再将沉淀物进行水洗、冷冻干燥即得蛋氨酸寡肽；上述制备方法能够得到包含蛋氨酸二肽至十肽中任意一种或多种成分的蛋氨酸寡肽，而且产率高；此外，采用原料较少，制备工艺简单，易于操作。

技术领域

本发明涉及蛋氨酸寡肽技术领域，具体而言，涉及一种蛋氨酸寡肽及其制备方法和应用。

背景技术

蛋氨酸是植物蛋白源中重要的限制性必需氨基酸，其广泛应用于畜禽水产饲料中，为达到氨基酸平衡的目的，其常以晶体氨基酸盐或包埋的形式补充；然而，采用上述补充方式存在晶体蛋氨酸在水中易溶失，而且晶体蛋氨酸和蛋白质结合态蛋氨酸吸收不同步问题；降低了蛋氨酸的利用率。

例如，公开号为CN102429109A的中国专利申请，公开了一种蛋氨酸寡肽，该蛋氨酸寡肽的制备方法为：首先将蛋氨酸乙酯盐酸盐(H-Met-OEt.HCl)配成300mg/ml的pH为5.5的柠檬酸钠溶液；其次将木瓜蛋白酶溶解于含0.1M的半胱氨酸和10mM EDTA的pH为6.5的水溶液中制成木瓜蛋白酶溶液；然后将木瓜蛋白酶溶液按照质量比1∶200加入到蛋氨酸乙酯盐酸溶液中，37℃条件下反应2h；收集沉淀后，上清液中再按质量比1∶200加入木瓜蛋白酶溶液，在37℃条件下反应过夜；反应结束后，用蒸馏水稀释产品，并加热至90℃来灭活蛋白酶；将水不溶物在蒸馏水中洗三次，冷冻干燥产品即制得蛋氨酸寡肽混合物。但该制备方法制备得到的蛋氨酸寡肽为二肽至八肽的混合物，而且产率较低，反应过程使用试剂较多，反应较繁琐。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蛋氨酸寡肽的制备方法，该制备方法能够得到包含蛋氨酸二肽至十肽中任意一种或多种成分的蛋氨酸寡肽，而且产率高；此外，采用原料较少，制备工艺简单，易于操作。

本发明的另一目的在于提供一种蛋氨酸寡肽，该蛋氨酸寡肽不易溶于水，并且利于吸收利用。

本发明的目的还在于提供一种蛋氨酸寡肽在畜禽水产饲料中的应用，该应用解决了蛋氨酸易于在水中溶失，并能够促进蛋氨酸寡肽释放的蛋氨酸与饲料中蛋白质结合态蛋氨酸同步吸收，提高了蛋氨酸的利用率。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明第一方面提供一种蛋氨酸寡肽的制备方法，该制备方法包括如下步骤：

(a)将蛋白酶溶于缓冲液并离心，得到浓度为22-28mg/ml的蛋白酶溶液；

(b)将L-Met-OEt.HCl(L-蛋氨酸乙酯盐酸盐)溶于缓冲液并水浴，得到浓度为0.24-0.26M的L-Met-OEt.HCl溶液；

(c)将蛋白酶溶液与L-Met-OEt.HCl溶液按照体积比为1∶(0.8-1.2)混合，并在48-52℃下进行反应，随后，对反应液中蛋白酶进行灭活处理；

(d)将灭活处理后的混合液冷却、离心收集沉淀物，再将沉淀物进行水洗、冷冻干燥即得蛋氨酸寡肽。

本发明通过对蛋白酶和L-Met-OEt.HCl浓度的限定，以及对反应温度的限制，能够提高蛋白酶的活性，促进蛋氨酸寡肽的生成，提高蛋氨酸寡肽的产率；此外，本发明中通过对蛋白酶进行离心处理，能够活化蛋白酶，利于提高蛋氨酸寡肽的生成效率。