[发明专利]一种EB病毒特异性T细胞抗原受体及其应用

说明书

一种EB病毒特异性T细胞抗原受体及其应用。本发明提供了一种特异性结合人类疱疹病毒(HHV‑4)即EB病毒(Epstein‑Barr Virus，EBV)潜伏期膜蛋白LMP2肽(包含序列TYGPVFMCL和/或TYGPVFMSL)的T细胞抗原受体(TCR)及其在制备治疗与EBV相关疾病的药物中的应用或在制备杀伤小鼠肿瘤细胞、提高小鼠存活率的产品中的应用。本发明所述的TCR能够特异性地被病毒抗原肽提呈细胞激活，提高胞外细胞因子IFNγ、IL2的释放水平及乳酸脱氢酶释放量，且显著地杀伤靶细胞。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种针对EBV LMP2表位的高亲和力T细胞抗原特异性受体及其制备方法，以及其在制备治疗与EBV相关的疾病的药物中的应用或在制备杀伤小鼠肿瘤细胞、提高小鼠存活率的产品中的应用。

背景技术

T细胞抗原受体(T cell receptor，TCR)对免疫系统的细胞免疫功能是至关重要的，TCR是呈递在主要组织相容性复合体(MHC)上的特异性抗原肽的唯一受体，通过抗原特异性TCR与pMHC复合物结合引发T细胞与抗原呈递细胞直接的物理接触，相互作用，导致一系列后续细胞信号传递和其他生理反应，从而使得不同抗原特异性的T细胞对其靶细胞发挥免疫效应。

EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)也称人类疱疹病毒4型，属于γ疱疹病毒，是最常见的引起人类疾病的病毒之一，主要感染B细胞和鼻咽上皮细胞。EBV感染分为增殖型感染和潜伏型感染。潜伏型表达的蛋白主要包括6个核蛋白EBNA1、2、3A、3B和3C，EBNA-LP以及3个潜伏期膜蛋白LMP1、LMP2A、LMP2B，其中LMP2B是LMP2A的截短异形体。根据不同疾病表达的潜伏蛋白谱的差异，将潜伏型分为I、II、III期。

专利CN108289950A公开了一种特异于人HLA呈递的EBV LMP2的T细胞受体样抗体药剂，其中所述的T细胞受体识别的抗原肽表位为CLGGLLTMV。专利CN1526072A公开了EBV肿瘤相关潜伏膜蛋白的胞外结构域的鉴定方法和与之反应的抗体试剂的选择方法，其中EBVLMP2胞外域的氨基酸序列为4-9中的任一个。及CN1269804A中公开的众多EBV的T细胞CTL表位。但是均非公开本发明所述的TCR特异性识别及结合的表位。

因此，本发明提供了一种T细胞抗原受体，能够特异性地被病毒抗原肽提呈细胞激活，提高胞外细胞因子IFNγ、IL2的释放水平及乳酸脱氢酶释放量，且显著地杀伤靶细胞。

发明内容

本发明提供了一种T细胞抗原受体(TCR)，其特异性结合EBV潜伏期膜蛋白LMP2，所述的EBV潜伏期膜蛋白LMP2包含SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：20所示的氨基酸序列。

优选的，所述的T细胞抗原受体特异性结合EBV潜伏期膜蛋白LMP2肽，所述的EBV潜伏期膜蛋白LMP2肽包含SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：21所示的氨基酸序列。

本发明所述的SEQ ID NO：1具体序列为：TYGPVFMCL。

本发明所述的SEQ ID NO：21具体序列为：TYGPVFMSL。

在本发明的一个具体实施方式中，所述的EBV潜伏期膜蛋白LMP2肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示，或与SEQ ID NO：8所示序列具有至少80％同源性并具有抗原活性的序列。