[发明专利]一种LFF2细胞在审
| 申请号： | 201811153234.4 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109294983A | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 焦顺昌;张嵘;张天赋;周子珊;宋玉洁;陈小彬;吴子明 | 申请（专利权）人： | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 100096 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞 抗原呈递细胞 生物技术领域 抗原表位肽 信号分子 抗肿瘤 慢病毒 抑制性 靶点 转染 制备 封闭 刺激 | ||
1.一种LFF2细胞，其特征在于，所述LFF2细胞的制备方法，包括以下步骤：1)抽取患者外周血，进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测；2)将抗原表位进行多肽连接后，筛选强免疫原性的多肽进行基因合成；3)构建表达抗原表位肽的慢病毒表达质粒，并进行慢病毒包装；4)使用表达抗原表位肽的慢病毒转染抗原呈递细胞，并与PBMC共孵育得到效应细胞；5)将T细胞上的免疫抑制性信号分子进行封闭，制备得到LFF2细胞。
2.如权利要求1所述LFF2细胞，其特征在于，所述患者外周血也可以是市售工程细胞系。
3.如权利要求1所述LFF2细胞，其特征在于，所述抗原表位的预测是以突变的氨基酸位点为中心，向两侧延伸8个氨基酸，作为潜在抗原表位。
4.如权利要求1所述LFF2细胞，其特征在于，所述表面免疫抑制性信号分子包括：PD-1、Tim-3、LAG3、CTLA-4、BTLA、VISTA、CD160或2B4(CD244)。
5.如权利要求1所述LFF2细胞，其特征在于，所述抗原表位预测的方法为：(1)以突变的氨基酸位点为中心，向两侧延伸8个氨基酸，将这段17个氨基酸的多肽作为“潜在抗原表位”；(2)使用预测软件分析潜在抗原表位的IC50，将IC50＜1000nM的潜在抗原表位确定为“抗原表位”。
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