[发明专利]一种蛇足石杉插条生根的方法

说明书

本发明公开了一种蛇足石杉插条生根的方法，包括将蛇足石杉插条在蛇足石杉外植体的培养液中预处理，再将预处理后的蛇足石杉插条在青苔基质中依次进行预培养和生根培养。该操作方法简单易行，为蛇足石杉扦插繁殖提供新方法。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及多酚的生物合成，具体涉及一种蛇足石杉插条生根的方法。

背景技术

蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.)Trev.)为石松目(Lycopodiales)石杉科(Lycopodiaceae)石杉属(LycopodiumL.)多年生草本蕨类植物。蛇足石杉在民间主要用于治疗跌打肿痛、内伤出血、毒虫毒蛇咬伤、烧伤烫伤等病症。1927年我国科技工作者报道了从该植物中分离的石杉碱甲具有横纹肌松弛作用，之后的大量研究发现石杉碱甲是一种高效、低毒、可逆和高选择性的乙酰胆碱酯酶抑制剂。现在，被石杉碱甲及经作为治疗阿尔茨海默病(AD，Alzheimer disease)的药物，同时在美国被用做益智的营养保健品。

然而，蛇足石杉自然资源严重短缺。蛇足石杉生长缓慢，野生状态其的繁殖主要以孢子繁殖为主，孢子萌发周期长，萌发后属地下生配子体，需6-15年才能成熟。因此极大地限制了蛇足石杉野生资源的再生。蛇足石杉中的石杉碱甲含量又很低(0.007％)，再加上其全合成石杉碱甲步骤繁琐、价格昂贵且有副作用。目前，石杉碱甲的提取主要依赖于野生资源，提取率仅为0.006％-0.1％，因而大量的市场需求、受限的自然资源和自身生长繁殖的限制。因此，不论是石杉碱甲直接或者间接获得都是以蛇足石杉的原植物为原料，这种自然界有限的资源将处于灭绝的边缘。因此，对蛇足石杉的人工繁殖迫在眉睫。

扦插繁殖主要是指将离体的植物营养器官(根、茎、叶等)插入一定的基质中，在适宜的条件下使离体的营养器官再生成一个完整新植株的繁殖方法。扦插繁殖不仅能保证在短时间内获得大量扦插成活苗，而且还能保持植物原有的遗传特性，是植物无性繁殖的重要方法之一。影响插苗生根成活的因素很多，除受到植物体自身的生物学特性、插条的发育程度及外界条件。有些植物种类比较容易扦插成功，也有一些植物很难扦插成功。因此，找到影响植物扦插生根的关键因素至关重要。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种蛇足石杉插条生根的方法，可用于蛇足石杉的人工扦插繁殖。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种蛇足石杉插条生根的方法，其特征在于，包括将蛇足石杉插条在蛇足石杉外植体的培养液中预处理，再将预处理后的蛇足石杉插条在青苔基质中依次进行预培养和生根培养。

具体地，所述的蛇足石杉外植体培养液的制备包括：将蛇足石杉的根、茎和/或叶于MS液体培养基中培养得到培养溶液，培养溶液中加入吲哚丁酸即得。

进一步地，所述的吲哚丁酸浓度为5mg/L。

具体地，所述的预处理是将蛇足石杉插条在生根培养液浸泡备用。

进一步地，所述的预处理阶段中，将插条用生根培养液浸泡的时间为6-12h。

具体地，所述的预培养是将预处理得到的插条扦插到青苔基质中，然后放置到温室中进行培养。

进一步地，所述的预培养时间为2-6d。

具体地，所述的生根培养是将预培养后的蛇足石杉插条更换到消毒后的青苔基质中，再用高锰酸钾溶液和甘露糖溶液依次对蛇足石杉插条进行温室培养。

进一步地，所述的高锰酸钾溶液的质量分数为0.3％，所述的甘露糖溶液的浓度为0.5-1.5mmol/L。

进一步地，所述的温室培养的温度为25±5℃，温室培养的湿度为60％，温室培养的光照强度为4000Lux，温室培养的光周期为16h。