[发明专利]一种改进的Trizol提取DNA方法

权利要求书

1.一种改进的Trizol提取DNA方法，其特征在于：所需试剂和材料包括：磁珠、Trizol、氯仿、纯乙醇、氢氧化钠溶液、裂解缓冲液、清洗缓冲液、解吸缓冲液，所需设备包括：EP管、真空干燥箱、磁分离架、震荡机、离心机，所述氢氧化钠溶液浓度为3mol/L；所述解吸缓冲液根据DNA的不同进行制备，进而营造出利于DNA解吸的环境。

2.根据权利要求1所述的一种改进的Trizol提取DNA方法，其特征在于：具体方法如下：

(一)去除水相：将待提取DNA的样本放入EP管，并将Trizol加入EP管中，将EP管放入震荡机充分震荡8分钟，使溶液充分混合，然后加入氯仿再震荡20s，之后室温下静置5分钟，再将EP管放入离心机中，在1300倍重力、5℃的条件下进行10分钟离心，离心后溶液出现分层，分层的上层为水相层，将水相层去除，保留剩余层；

(二)DNA吸附磁珠：向步骤(一)保存剩余层的EP管中加入摩尔浓度为3mol/L的氢氧化钠，并混合均匀静置5分钟，再计入冰的纯乙醇，然后放入离心机中以1300倍重力的离心力离心处理3分钟，并在室温下静置使DNA发生沉淀，然后向溶液中计入裂解缓冲液，混合均匀后再加入磁珠，并将溶液放入震荡机进行充分震荡，在静置5分钟后放入磁分离架，去除上清液，保留磁珠，则DNA便吸附在磁珠表面；

(三)DNA解吸磁珠：向装有步骤(二)所得磁珠的EP管中加入清洗缓冲液，然后在震荡机中震荡，再利用磁分离架进行分离去除上清液，并再重复加入清洗缓冲液、震荡、去除上清液两次，将磁珠放入干燥箱真空干燥5小时，再取出并加入解吸缓冲液，并用震荡机进行充分震荡，震荡完成后放入磁分离架进行磁分离，保留上清液，DNA解吸结束，同时即可完成DNA的提取。

3.根据权利要求1、2所述的一种改进的Trizol提取DNA方法，其特征在于：所述步骤(一)待提取DNA的样本为预先制备的，在其制备过程中根据样本来源的不同，采取不同的工艺进行制备，以便进行后续的DNA提取工作。