[发明专利]一种安康鱼皮肽的制备方法及所制备的安康鱼皮肽的免疫调节应用

权利要求书

1.一种安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将回收的安康鱼的鱼皮下脚料清洗干净、剪片，然后脱脂处理；

（2）将脱脂后鱼皮投入分散有高温煅烧贻贝粉的水中浸没、脱味，然后过筛、冲洗回收鱼皮；

（3）把鱼皮加入到水中浸泡，并加酸液调节pH值为3.8～5.2，施加低压脉冲电场；

（4）过筛鱼皮、匀浆，然后加入蛋白提取酶和10～15倍重量的水混合，搅拌酶解，离心分离上清液得到鱼皮蛋白液，然后灭酶活性；

（5）向鱼皮蛋白液中加入蛋白分解酶处理、灭酶活性、然后经超滤膜截留分子量1000～3500Da的多肽分子得到安康鱼皮肽；

步骤（2）中高温煅烧贻贝粉经以下过程制成：将贻贝壳清洗干净后粉碎至60～80目，然后与碳酸钠、硅烷偶联剂按质量比1:0.03～0.05:0.1～0.2混合在1200～1300℃煅烧3～5h，降温后加入到0.05～0.1wt%的黄原胶水溶液中，并加入贻贝壳质量0.07～0.1wt%的胡敏素分散均匀，然后浓缩并冷冻干燥得到高温煅烧贻贝粉；

步骤（3）中的低压脉冲电场的电压为80～100V，频率为40～50Hz；

步骤（4）中蛋白提取酶为胰凝乳蛋白酶或曲霉菌丝氨酸蛋白酶，添加的蛋白提取酶的酶活力为5000～10000U/g，添加量为鱼皮的1～3wt%，提取时间8～12h，提取温度50～60℃；

步骤（5）中蛋白分解酶为胃蛋白酶，酶活力为30000～50000U/g，添加量为鱼皮蛋白液的3～7wt%，分解的pH值为2～4，分解温度为40～50℃，分解时间3～5h。

2.根据权利要求1所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（1）的脱脂过程如下：将鱼皮与水混合后加维生素E分散均匀，然后加脂肪酶30～40℃脱脂2～4h，再加异丙醇溶液再次脱脂1～3h，过筛鱼皮并用水冲洗至无异丙醇味，维生素E加入量为鱼皮的0.5～1wt%，脂肪酶加入量为鱼皮的1.2～2wt%，脂肪酶活力为30000～50000U/g，异丙醇溶液浓度为25～32wt%。

3.根据权利要求1所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所用酸液为酒石酸与水杨酸的混合水溶液，酒石酸与水杨酸的质量比为3～5:1，浸泡温度≤38℃。

4.根据权利要求1或3所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）还包括向调节pH值后的水中加入硼氢化钠或醋酸硼氢化钠，加入量为鱼皮的0.1～0.5wt%。

5.一种如权利要求1至4任一所述的制备方法所制得的安康鱼皮肽在免疫调节方面的应用，其特征在于，安康鱼皮肽用于促进RAW264.7的增殖。