[发明专利]一种植物免疫诱抗剂的鉴定方法

权利要求书

1.一种植物免疫诱抗剂的鉴定方法，其特征在于，包括：

(1)配制不同浓度梯度的待定试剂，以采用不同浓度待定试剂浸种的处理为处理组I，清水浸种的处理为对照组I，对植物种子进行浸种、清洗和催芽，得到不同处理下的植物幼苗；

(2)测定植物幼苗的根系农艺指标，以是否存在处理组I幼苗根系农艺指标显著大于对照组I的情况作为依据，判断待定试剂能否促进植物根系生长；

若处理组I中所有浓度梯度处理下的幼苗根系农艺指标均不显著大于对照组I，则判定待定试剂对植物根系生长无促进作用，不再进行后续鉴定步骤；反之，则判定待定试剂对植物根系生长有促进作用，并进一步确定待定试剂促进植物根系生长的有效浓度区间；

(3)从所述有效浓度区间内选择某一浓度，取出步骤(1)中该浓度处理下的植物幼苗，与对照组I幼苗一同置于1～10℃条件下进行低温逆境处理，得到处理组II和对照组II的幼苗，处理结束后，测定幼苗的主根褐化率和/或根系活力，统计分析两组数据是否具有显著性差异；

若处理组II幼苗的主根褐化率显著低于对照组II，和/或根系活力显著高于对照组II，则进行步骤(4)，反之，则判定待定试剂在表观上对植物根系无耐低温诱抗作用，不再进行后续鉴定步骤；

(4)取步骤(3)中处理组II和对照组II的幼苗，提取和分离幼苗根部的总蛋白，利用质谱技术获取蛋白质的鉴定和定量结果，并进一步筛选处理组II和对照组II之间的差异表达蛋白质，再利用基因功能和信号通路分析技术，寻找差异表达蛋白质中是否存在与低温逆境相关的功能性蛋白；

若存在与低温逆境相关的功能性蛋白，则判定待定试剂为具有耐低温诱抗作用的植物免疫诱抗剂，反之则无。

2.如权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述植物为水稻。

3.如权利要求2所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述催芽的温度为25～30℃，时间为30～50h。

4.如权利要求2所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(2)中，选择根长0.8～1.2cm、芽长0.4～0.6cm的水稻幼苗进行低温逆境处理；低温逆境处理的时间为40～50h。

5.如权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述待定试剂为果寡糖。

6.如权利要求5所述的鉴定方法，其特征在于，所述果寡糖为蔗果四糖。

7.如权利要求2或5任一项所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述待定试剂的浓度梯度设置范围为30～100ppm；所述浸种的温度为25～30℃，时间为20～30h。

8.如权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的根系农艺指标为主根长、侧根长、侧根数、侧根根毛数和根生物量中的至少一种。