[发明专利]一种双信号放大的生物传感器的组装方法及其应用

权利要求书

1.一种双信号放大的生物传感器的组装方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)制备金纳米探针：在2mLAuNPs溶液中加入50μL多肽溶液和50μL葡萄糖氧化酶溶液，置于振荡器上避光振荡12小时，将得到的探针12000转，4℃离心10min后，分散在2mL去离子水中，并放在4℃的冰箱中保存；

2)组装夹心型生物传感器：将0.5cm×0.5cmWS₂纳米线阵列材料浸入5μL适配体溶液中，孵化4小时，将电极用1％牛血清蛋白封闭30min，得到的电极用去离子水冲洗，然后，将0.5,1,2,5,8,10ng/mL的HER2加入电极，在4℃冰箱中孵化2小时后，用去离子水冲洗，最后，将40μL被标记的金纳米探针加入上述电极孵化2小时，将组装好的电极放入包含葡萄糖的PBS缓冲溶液中孵化25min后，取出电极，得到WS₂NW/TM-aptamer-HER2-[peptide-AuNPs-GOx]夹心型双信号放大的生物传感器。

2.根据权利要求1所述的一种双信号放大的生物传感器的组装方法，其特征在于，步骤1)中多肽和葡萄糖氧化酶的浓度均为0.4ng/mL。

3.根据权利要求1所述的一种双信号放大的生物传感器的组装方法，其特征在于，步骤2)中葡萄糖的浓度为10mM。

4.根据权利要求1所述的一种双信号放大的生物传感器的组装方法，其特征在于，步骤2)中PBS缓冲溶液的浓度为0.1mol/L，其pH＝7.0。

5.一种如权利要求1所述的双信号放大的生物传感器的组装方法，其特征在于，WS₂纳米线阵列材料的制备方法，包括以下步骤：

1)向反应容器中加入1.6493gNa₂WO₄·2H₂O以及40mL去离子水，搅拌30min；

2)逐滴加入3MHCl将溶液的pH调至1.2，此时溶液由无色变为淡黄色；

3)将1.765gH₂C₂O₄加入到上述步骤（2）中制得的混合溶液中，搅拌至溶解，然后稀释至100mL得到H₂WO₄前驱；

4)取40mLH₂WO₄前驱溶液依次加入2g(NH₄)₂SO₄和0.411g硫脲，搅拌至溶解，转移至高压反应釜中；

5)将2cm×4cm的钛网依次用浓盐酸、乙醇、去离子水处理数次后放入反应釜中，180℃，反应16小时，反应结束后，将钛网取出用去离子水洗涤数次，60℃烘干12小时；

6)将得到的样品转移至管式炉中，在空气气氛中450℃焙烧1小时。

6.一种采用如权利要求1-4任一组装方法所得到的双信号放大的生物传感器的应用，其特征在于，所得WS₂NW/TM-aptamer-HER2-[peptide-AuNPs-GOx]夹心型双信号放大的生物传感器在HER2检测中的应用。