[发明专利]一种用于检测细胞角蛋白19片段的试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测细胞角蛋白19片段的试剂盒，包括包被板、酶结合物、发光底物A、发光底物B、样品稀释液、洗液、子母袋、板贴，其中样品稀释液的组分包括10~200mmol/L的缓冲液，0.1~0.5%的防腐剂，1~5%的蛋白质类稳定剂，5~10%的糖类稳定剂，1~5%的EDTA,0.1~0.5%的表面活性剂。本发明的优点在于样品稀释液在加样后会明显改变颜色，使得操作者在加入待测物后试剂颜色会立刻发生明显变化，易于裸眼观察，从而避免重复加样。本发明试剂盒与市场现有同类产品相比具有更宽的线性范围，且反应过程无需加热，室温震荡即可充分反应。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，尤其是涉及一种用于检测细胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）的试剂盒。

背景技术

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位，而其中非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%，约75%的患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。细胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）目前被认为是一种主要用于检测肺癌的肿瘤标记物，尤其对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC)的诊断具有重要价值。

细胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）是细胞角蛋白19的水溶性片段，因其可特异性的与两株单克隆抗体BM 19.21和KS 19.1结合，故称为Cyfra21-1。在恶性上皮细胞中，细胞角蛋白19经常被降解为多个片段，并释放进入血液循环中，故在临床血清检测中，Cyfra21-1常被认为是细胞角蛋白19的有效检测片段。如果肺部存在不清晰的环形阴影，同时血清Cyfra21-1浓度>30ng/mL，原发性支气管肺癌的可能性非常高。Cyfra21-1的血清浓度水平高低与肿瘤临床分期正相关，也可作为肺癌手术和放化疗后追踪早期复发的有效指标，其在各类非小细胞肺癌阳性检出率为70%～85%。Cyfra21-1的血清高浓度水平提示疾病处于进展期和预后不良。治疗成功的标志是Cyfra21-1的血清浓度迅速下降，反之则表示病灶未完全清除。血清水平下降后又升高，则提示疾病复发。

目前市场上用于检测细胞角蛋白19片段的产品（如北京华科泰、天津博奥塞斯、北京科美等）普遍存在向包被板微孔中加入样本后裸眼识别不明显，操作者有时不能准确判断微孔中是否加入待测样本的问题。

发明内容

本发明的目的在于针对上述现有技术存在的缺陷，提供一种用于检测细胞角蛋白19片段的试剂盒，该试剂盒可在加入待测物后易于操作者裸眼观察，避免了重复加样。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的用于检测细胞角蛋白19片段的试剂盒，包括样品稀释液，所述样品稀释液的组分包括10~200mmol/L的缓冲液， 0.1~0.5%的防腐剂，1~5%的蛋白质类稳定剂，5~10%的糖类稳定剂，1~5%的EDTA, 0.1~0.5%的表面活性剂。

实际配制时，所述缓冲液采用PH 6~8的MES缓冲液。

所述防腐剂可使用Proclin 300、MIT、Bro、IPBC或NaN₃中的一种或两种以上的混合物。

所述蛋白质类稳定剂可使用酪蛋白、鱼明胶或牛血清白蛋白中的一种或两种以上混合物。

所述糖类稳定剂可使用蔗糖、海藻糖或葡萄糖中的一种或两种以上混合物。

所述表面活性剂可使用Triton X-100、Tween 20、Tween 60或辛基酚聚氧乙烯醚中的一种或两种以上混合物。

所述EDTA可单独使用乙二胺四乙酸二钠或乙二胺四乙酸二钾，也可以将二者混合使用。