[发明专利]制备人绒毛膜干细胞培养液的方法及其应用在审
申请号: | 201811128285.1 | 申请日: | 2018-09-27 |
公开(公告)号: | CN109234228A | 公开(公告)日: | 2019-01-18 |
发明(设计)人: | 魏色东 | 申请(专利权)人: | 深圳市乔水生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K8/99;A61K8/9794;A61Q19/00 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 肖宇扬;付静 |
地址: | 518000 广东省深圳市福田区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 绒毛膜 干细胞培养液 钴60 γ射线 干细胞 护肤美容品 传代培养 消化 制备 基质细胞衍生因子 干细胞培养基 干细胞培养物 对数生长期 绒毛膜细胞 悬浮培养法 活性物质 细胞悬液 悬浮细胞 胰酶消化 有效富集 照射剂量 抗老化 球悬液 无血清 富集 胰酶 分泌 过滤 应用 照射 | ||
1.一种制备人绒毛膜干细胞培养液的方法,包括以下步骤:
步骤a.使用0.25vol%胰酶消化处于对数生长期的JEG-3人绒毛膜细胞系;
步骤b.移除胰酶消化液终止消化,利用无血清悬浮培养法富集含有所述JEG-3人绒毛膜细胞系的细胞悬液中的人绒毛膜干细胞,获得JEG-3悬浮细胞球悬液;
步骤c.利用0.05%胰酶和0.02%EDTA对所述JEG-3悬浮细胞球悬液进行消化,终止消化后,加入干细胞培养基传代培养,传代培养过程中提供2~4Gy剂量钴60γ射线照射,照射剂量率为165.44cGy/min,并加入基质细胞衍生因子-1α,获得人绒毛膜干细胞培养物;
步骤d.将所述人绒毛膜干细胞培养物离心,过滤,除去人绒毛膜干细胞,得到滤液即为所述人绒毛膜干细胞培养液。
2.如权利要求1所述制备人绒毛膜干细胞培养液的方法,其特征在于:在所述步骤c的培养过程中加入0.2mg/L基质细胞衍生因子-1α。
3.如权利要求1所述制备人绒毛膜干细胞培养液的方法,其特征在于:在所述步骤c中,提供4Gy剂量的钴60γ射线照射。
4.采用如权利要求1~3任一项所述的方法制备的人绒毛膜干细胞培养液。
5.如权利要求4所述人绒毛膜干细胞培养液在护肤美容用品中的应用。
6.一种护肤美容用品,其特征在于:含有如权利要求4所述的人绒毛膜干细胞培养液。
7.如权利要求6所述的护肤美容用品,其特征在于:所述护肤美容用品包括清洁类产品、美白除皱类产品以及化妆类产品。
8.如权利要求7所述的护肤美容用品,其特征在于:
所述清洁类产品包括洗手液、沐浴产品、洗发护发产品、洁面产品和卸妆产品;
所述美白除皱类产品包括:润肤霜、爽肤水、收缩水、化妆水、乳液、日霜、晚霜、精华液、眼霜、护手霜、防裂膏、营养液;
所述化妆类产品包括:妆前乳、隔离霜、粉底霜、唇膏、胭脂、花露水、香粉和面膜。
9.如权利要求8所述的护肤美容用品,其特征在于,所述护肤美容用品为修复营养液,除了水分,其含有重量百分比为50~75%的所述人绒毛膜干细胞培养液,且还含有如下重量百分比组分:
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