[发明专利]突变型单链人凝血因子VIII融合蛋白及其制备方法与用途

权利要求书

1.一种人凝血因子VIII的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的代码是SS-F8，而且其氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示。

2.编码如权利要求1所述的融合蛋白的DNA。

3.如权利要求2所述的DNA，其序列如SEQ ID NO：10所示。

4.一种载体，其特征在于，包含如权利要求2或3所述的DNA。

5.一种宿主细胞，其特征在于，包含如权利要求2或3所述的DNA，或者转染了权利要求4所述的载体。

6.一种药物组合物，其特征在于，包含药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂，以及有效剂量的如权利要求1所述的融合蛋白。

7.一种如权利要求1所述的融合蛋白的制备方法，所述方法包括：

(a)将权利要求2或3所述的DNA引入CHO细胞，生成CHO衍生的细胞系；

(b)筛选步骤(a)中在其生长培养基中每24小时期间内，表达超过1IU/10⁶个细胞的高产细胞株；

(c)培养步骤(b)筛选到的细胞株，表达融合蛋白；

(d)收获步骤(c)得到的发酵液，并分离纯化融合蛋白。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述步骤(d)中融合蛋白纯化过程包含亲和层析、疏水层析、阴离子交换层析和分子筛层析。

9.一种如权利要求1所述的融合蛋白在制备用于预防或治疗出血性疾病的药物中应用。

10.如权利要求9所述的应用，其中，用于预防或治疗出血性疾病是用于FVIII先天性或获得性缺乏症患者的出血性疾病的预防或治疗、血友病A患者的自发或手术性出血的预防或治疗。